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DNA甲基化是潛力的早篩及MRD的標(biāo)志物,基于NGS的甲基化檢測(cè)中,重亞硫酸氫鹽轉(zhuǎn)化是DNA甲基化檢測(cè)的“金標(biāo)準(zhǔn)”,轉(zhuǎn)化率可達(dá)99.5%以上,但重亞硫酸鹽處理會(huì)導(dǎo)致嚴(yán)重的DNA損傷、片段化及解鏈。此外,一些低質(zhì)量或嚴(yán)重降解的DNA(cfDNA、ctDNA、FFPEDNA、古生菌DNA等)中也含有大量的DNA單鏈,采用常規(guī)雙鏈建庫(kù),文庫(kù)轉(zhuǎn)化效率較低,測(cè)序數(shù)據(jù)質(zhì)量差。而單鏈建庫(kù)可以大幅提高DNA原始分子的利用率,提高文庫(kù)的復(fù)雜性,在低起始量樣本的甲基化文庫(kù)和基因組文庫(kù)構(gòu)建中具有顯著的優(yōu)勢(shì)。圖1.甲基
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HiSpecif®高特異性抗體定制服務(wù)平臺(tái)
翌圣生物擁有基于雜交瘤細(xì)胞技術(shù)、噬菌體展示技術(shù)和單個(gè)B細(xì)胞開發(fā)技術(shù)的抗體開發(fā)三大技術(shù)。更擁有納米抗體庫(kù)、千億級(jí)全人源天然抗體庫(kù)可供篩選各類藥物靶點(diǎn),大大縮短藥物開發(fā)周期??商峁┛蒲泻凸I(yè)客戶所需的各類抗體定制需求。最新推出,基于單B細(xì)胞篩選平臺(tái),周期短,通量高,抗體重輕鏈天然配對(duì),該平臺(tái)的上線將給抗體發(fā)現(xiàn)領(lǐng)域帶來重大突破,可廣泛應(yīng)用于創(chuàng)新型抗體藥物早期發(fā)現(xiàn)、改良型抗體藥物開發(fā)、診斷檢測(cè)類抗體發(fā)現(xiàn)以及抗體工程改造等領(lǐng)域。我們的優(yōu)勢(shì)專業(yè)的研發(fā)團(tuán)隊(duì):研發(fā)團(tuán)隊(duì)成員深耕抗體開發(fā)各大平臺(tái)數(shù)十年,具有豐富的項(xiàng) -
E.coli殘留RNA檢測(cè)Kit,嚴(yán)格監(jiān)測(cè)質(zhì)粒DNA純度
E.coli宿主菌應(yīng)用及其殘留RNA質(zhì)控已知,大腸桿菌(E.coli)表達(dá)系統(tǒng)是分子量較小蛋白或結(jié)構(gòu)相對(duì)簡(jiǎn)單蛋白表達(dá)的宿主,主要表達(dá)胰島素、干擾素和白介素等細(xì)胞因子類藥物,這些藥物中宿主殘留核酸和蛋白的含量需要嚴(yán)格控制。另外,在細(xì)胞和基因治療等領(lǐng)域,E.coli宿主菌通常被用于起始原材料質(zhì)粒DNA的制備。質(zhì)粒DNA做為細(xì)胞治療和基因治療藥物的中間品或終產(chǎn)品,其中RNA片段的殘留可能會(huì)降低DNA產(chǎn)品純度,還可能會(huì)對(duì)其品質(zhì)和安全性等產(chǎn)生一定的干擾,因此需對(duì)質(zhì)粒DNA樣本中宿主菌殘留RNA的含量加以限 -
漲知識(shí) | qPCR專場(chǎng)二:如何獲取高質(zhì)量的cDNA模板?
熒光定量PCR是實(shí)驗(yàn)室中出鏡率非常高的一種檢測(cè)方法。該方法通過在PCR體系中添加熒光基團(tuán)來記錄DNA產(chǎn)物的累積情況,從而達(dá)到對(duì)PCR過程進(jìn)行實(shí)時(shí)監(jiān)控的目的,并且可以通過數(shù)據(jù)分析計(jì)算出起始模板量,這就是“熒光定量”中“定量”一詞的來源。熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)因?yàn)殪`敏度高所以經(jīng)常是差之毫厘謬以千里,所以在實(shí)驗(yàn)過程中,我們需要注意諸多細(xì)節(jié),謹(jǐn)慎操作。小伙伴們看到這里就要著急了,我怎樣才能做好qPCR實(shí)驗(yàn),拿到實(shí)驗(yàn)結(jié)果,發(fā)表高分文章,走上人生呢?對(duì)于熒光定量PCR反應(yīng)體系而言,cDNA模板的質(zhì)量至關(guān)重要。c -
克隆是英文“clone”或“cloning”的音譯,而英文“clone”則起源于希臘文“Klone”,原意是指以幼苗或嫩枝插條,以無性繁殖或營(yíng)養(yǎng)繁殖的方式培育植物,如扦插和嫁接。1963年J.B.S.Haldane在題為“人類種族在未來二萬年的生物可能性”的演講上采用“克隆(Clone)”的術(shù)語(yǔ),把“克隆技術(shù)”帶到了人們的視野中,其本身的含義是無性繁殖??寺〖夹g(shù)又稱為“生物放大技術(shù)”,它經(jīng)歷了三個(gè)發(fā)展時(shí)期:01微生物克隆時(shí)期即用一個(gè)細(xì)菌可以很快復(fù)制出成千上萬個(gè)和它一模一樣的細(xì)菌,從而變成一個(gè)細(xì)菌
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Smart-seq3xpress:更低成本、更高通量的單細(xì)胞測(cè)序技術(shù)
單細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組測(cè)序可以研究細(xì)胞內(nèi)RNA轉(zhuǎn)錄本的異質(zhì)性和復(fù)雜性,揭示組織/器官/生物體內(nèi)不同細(xì)胞類型的組成和功能,目前在胚胎發(fā)育、細(xì)胞分化、神經(jīng)科學(xué)、腫瘤免疫等領(lǐng)域都有重要的應(yīng)用?;赟MART(Switchingmechanismatthe5′endoftheRNAtemplate)技術(shù)的Smart-seq2是主要的單細(xì)胞測(cè)序技術(shù)之一,具有高靈敏度、全長(zhǎng)轉(zhuǎn)錄本覆蓋度、可檢測(cè)到稀有轉(zhuǎn)錄本等特點(diǎn),應(yīng)用場(chǎng)景廣泛。圖1.Smart-seq2技術(shù)流程圖[1]但基于平板的Smart-seq2技術(shù),分析通量低且 -
護(hù)航全流程!宿主核酸殘留去除與檢測(cè)完整方案·背景介紹·近年來,生物制品已應(yīng)用到生物醫(yī)藥、生物農(nóng)業(yè)、生物能源、生物制造、生物環(huán)保等多種領(lǐng)域。隨著生物制品的市場(chǎng)占比越來越大,針對(duì)生物制品,國(guó)家和相關(guān)部門也建立起規(guī)范的質(zhì)量管理體系和標(biāo)準(zhǔn),其中宿主細(xì)胞核酸殘留問題是備受關(guān)注的焦點(diǎn)之一。生物制品如重組蛋白藥、抗體藥、疫苗、細(xì)胞與基因藥物等產(chǎn)品是用連續(xù)傳代的菌種株/細(xì)胞株表達(dá)的,因而產(chǎn)品內(nèi)可能會(huì)殘存宿主核酸。殘留的宿主細(xì)胞核酸可能引發(fā)細(xì)胞因增殖失控變?yōu)槟[瘤細(xì)胞,也有可能存在感染性病毒基因從而加劇體內(nèi)免疫反應(yīng)
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Exonuclease I:特異性去除單鏈DNA,PCR引物去除的選擇
核酸外切酶I(ExonucleaseI)是一種對(duì)變性或單鏈脫氧核糖核酸具有高度選擇性的核酸外切酶,作用時(shí),ExonucleaseI從單鏈聚脫氧核糖核苷酸的3羥基端開始攻擊,隨后逐步釋放出脫氧核糖核苷5'-單磷酸鹽,但末端二核苷酸會(huì)保持完整,對(duì)雙鏈DNA或RNA無活性。常用于在Sanger測(cè)序或SNP分析之前去除PCR反應(yīng)中的單鏈引物、去除巢式PCR中的單鏈引物、PCR產(chǎn)物酶法純化、從核酸混合物中去除含有3'羥基末端的單鏈DNA等。圖1.ExonucleaseI降解單鏈DNA示意圖翌圣的Exonu