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巨噬細(xì)胞清除操作及文獻(xiàn)實(shí)例分析
01巨噬細(xì)胞清除簡(jiǎn)介巨噬細(xì)胞是體內(nèi)每個(gè)器官中都存在的細(xì)胞,存在于表皮、角膜和沒有血管的關(guān)節(jié)內(nèi)部,其體內(nèi)生物學(xué)研究的重要方法之一是巨噬細(xì)胞耗竭。清除巨噬細(xì)胞,可以全面了解巨噬細(xì)胞在病理?xiàng)l件下的功能。目前,巨噬細(xì)胞清除的主要方法包括構(gòu)建巨噬細(xì)胞缺失動(dòng)物模型和使用藥物(氯膦酸鹽脂質(zhì)體)去除法,但是,構(gòu)建巨噬細(xì)胞缺失動(dòng)物模型價(jià)格昂貴,周期長(zhǎng),因此,氯膦酸鹽脂質(zhì)體(ClodronateLiposomes)是目前最為成熟、方便、經(jīng)濟(jì)的一種巨噬細(xì)胞清除工具,可以有效的清除動(dòng)物體內(nèi)包括肝臟,脾臟,肺部,血液等多 -
精彩回顧 | 四企聯(lián)動(dòng),共話病原快檢——高通量測(cè)序技術(shù)助力病原快檢與防控
精彩回顧|四企聯(lián)動(dòng),共話病原快檢——高通量測(cè)序技術(shù)助力病原快檢與防控8月24日下午,由華大智造、吉因加、金匙醫(yī)學(xué)和翌圣生物聯(lián)合主辦的“四企聯(lián)動(dòng),共話病原快檢——高通量測(cè)序技術(shù)助力病原快檢與防控”的云聽會(huì)落幕,這場(chǎng)齊聚設(shè)備商、服務(wù)商和原料商的研討會(huì),從不同的視覺角度,為賦能病原領(lǐng)域的診斷和監(jiān)測(cè)等角度提供不同的病原快檢與防控見解,思想的碰撞為大家?guī)?lái)了病原快檢前沿的新設(shè)備、新興技術(shù)和優(yōu)質(zhì)試劑。四企聯(lián)動(dòng)賦能病原快檢與防控華大智造DNBSEQ測(cè)序平臺(tái)加速病原檢測(cè)。華大智造帶來(lái)了全球同等通量測(cè)序儀中速度最 -
mRNA合成的關(guān)鍵步驟之一是將質(zhì)粒DNA進(jìn)行線性化,這一步需要使用限制性內(nèi)切酶,IIs型內(nèi)切酶是質(zhì)粒線性化的內(nèi)切酶,因?yàn)樗鼈冊(cè)谧R(shí)別位點(diǎn)下游切割DNA,可確保所設(shè)計(jì)的poly(A)尾的完整性,線性化后的DNA模板上不會(huì)留下“疤痕”,IVT過(guò)程中也不會(huì)添加不需要的核苷酸。BsaI是常見的IIs型內(nèi)切酶之一,在mRNA合作中起著重要作用。圖1.BsaI識(shí)別位點(diǎn)及切割序列翌圣GMP級(jí)別BsaI翌圣的BsaI由大腸桿菌重組表達(dá),GMP標(biāo)準(zhǔn)生產(chǎn),酶切效率高、星號(hào)活性低、末端完整性良好,可用于mRNA疫苗生產(chǎn)
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說(shuō)到RNA提取,總是避不開Trizol(此處指總RNA抽提試劑,下同),作為總RNA提取的方法,裂解能力強(qiáng),適用范圍廣,適用動(dòng)植物組織還有小量樣本及難提取的組織,例如皮膚,結(jié)締組織,還可以用于細(xì)菌真菌等微生物的總RNA提取,優(yōu)點(diǎn)顯而易見,缺點(diǎn)也是不容忽視,Trizol它離不開氯仿?。÷确略缭?017年就被世衛(wèi)癌癥研究機(jī)構(gòu)列入2B類致癌清單了,吸入,食入,皮膚吸收,主要作用于中樞神經(jīng),有麻醉作用,對(duì)心、肝、腎有損害,還有提取伴侶β-巰基乙醇也是危險(xiǎn)品,刺激眼睛、呼吸道粘膜,引起慢性咽炎,經(jīng)皮膚、吞
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常用報(bào)告基因有哪些種類?一文讀懂!什么是報(bào)告基因?報(bào)告基因(reportergene)是一種編碼在內(nèi)源蛋白背景下易被檢測(cè)出來(lái)的蛋白質(zhì)或酶的基因。報(bào)告基因與目的基因或調(diào)控序列相連,通過(guò)間接或直接檢測(cè)報(bào)告基因編碼產(chǎn)物的信號(hào),比如報(bào)告蛋白、mRNA、酶等,直觀反映細(xì)胞內(nèi)基因的轉(zhuǎn)錄活性或表達(dá)水平。一般報(bào)告基因的特點(diǎn)是無(wú)毒、無(wú)免疫原性、易于檢測(cè)、具有一定的特異性。報(bào)告基因編碼產(chǎn)物的半衰期是比較關(guān)注的一個(gè)關(guān)鍵點(diǎn)。編碼產(chǎn)物半衰期和報(bào)告基因的應(yīng)用領(lǐng)域息息相關(guān)。[1]那么報(bào)告基因該如何選擇呢?在選擇報(bào)告基因時(shí)一般
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漲知識(shí)|qPCR專場(chǎng)四:?jiǎn)栴}圖表分析及實(shí)驗(yàn)案例
漲知識(shí)|qPCR專場(chǎng)四:?jiǎn)栴}圖表分析及實(shí)驗(yàn)案例熒光定量PCR是實(shí)驗(yàn)室中出鏡率非常高的一種檢測(cè)方法。該方法通過(guò)在PCR體系中添加熒光基團(tuán)來(lái)記錄DNA產(chǎn)物的累積情況,從而達(dá)到對(duì)PCR過(guò)程進(jìn)行實(shí)時(shí)監(jiān)控的目的,并且可以通過(guò)數(shù)據(jù)分析計(jì)算出起始模板量,這就是“熒光定量”中“定量”一詞的來(lái)源。熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)因?yàn)殪`敏度高所以經(jīng)常是差之毫厘謬以千里,所以在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,我們需要注意諸多細(xì)節(jié),謹(jǐn)慎操作。小伙伴們看到這里就要著急了,我怎樣才能做好qPCR實(shí)驗(yàn),拿到實(shí)驗(yàn)結(jié)果,發(fā)表高分文章呢?在熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)中,難 -
新品│Endonuclease VIII:精準(zhǔn)切割DNA受損堿基,助力基因損傷修復(fù)研究
新品│EndonucleaseVIII:精準(zhǔn)切割DNA受損堿基,助力基因損傷修復(fù)研究核酸內(nèi)切酶Ⅷ(EndonucleaseVIII,EndoⅧ)是一種具有N-糖基化酶活性(N-glycosylase)和AP-裂解酶(AP-lyase)活性的DNA損傷修復(fù)酶,參與氧化產(chǎn)生的DNA損傷的堿基切除修復(fù)。作用原理EndonucleaseVIII識(shí)別雙鏈DNA上受損堿基并在其N-糖基化酶活性作用下切除雙鏈DNA上受損的嘧啶堿基,產(chǎn)生一個(gè)脫嘌呤(AP)位點(diǎn)。隨后,在其AP裂解酶活性作用下切割A(yù)P位點(diǎn)的3'和 -
超低殘留分子酶,病原檢測(cè)和生物制品質(zhì)控試劑盒開發(fā)利器!
精品推薦|UCF.ME超低殘留分子酶,病原檢測(cè)和生物制品質(zhì)控試劑盒開發(fā)利器!近年來(lái)全球感染性疾病的發(fā)病率有所上升,病原體呈現(xiàn)多樣化和復(fù)雜化的發(fā)展趨勢(shì),半數(shù)患者存在病原體不明的困境,病原體的快速診斷面臨嚴(yán)峻挑戰(zhàn)。目前用于臨床病原體檢測(cè)的方法主要包括傳統(tǒng)培養(yǎng)法、PCR法、宏基因組測(cè)序(mNGS)、病原靶向測(cè)序(tNGS)等。新冠核酸檢測(cè)讓熒光PCR技術(shù)大放異彩,新冠之后mNGS因抗疫揚(yáng)名,一度被臨床醫(yī)生所青睞,逐步走向?qū)こ0傩占摇NGS靶向測(cè)序技術(shù)更是異軍突起,以其對(duì)“PCR”和“NGS”兼容并蓄