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JM109 Chemically Compete Cell

基因型：

endA1 recA1 gyrA96 thi-1 hsdR17 (rk-,mk+) relA1 supE44D (lac-proAB) [F′traD36 proAB laqIqZΔM15

简要说明：

JM109菌株来源于E.coli K strain，是提取高质量DNA的理想菌株，recA1 和 endA1 的突变有利于克隆DNA 的稳定和高纯度质粒 DNA 的提取。携带 hsdR17基因型背景，使得异源DNA不被内源核酸酶系统降解。laqI qZΔM15的存在使JM109可用于构建克隆，蓝白斑筛选实验；High5TM系列JM109感受态细胞经特殊工艺制作，经pUC19质粒检测转化效率可达1×109cfu/μg。

操作说明：

1.JM109感受态细胞放置冰中融化（或放手心或室温片刻，待菌体处于冰水混合状态时迅速插入冰中），加入目的DNA（质?；蛄硬铮┎⒂檬执駿P管底轻轻混匀，冰上静置25分钟。

2.42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。

3.向离心管中加入700μl不含抗生素的2YT或LB无菌培养基，混匀后37℃，200rpm复苏60分钟。

4.5000rpm离心一分钟收菌，留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。

5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。

注意事项：

1.感受态细胞最好在冰上融化。冰上放置大约5分钟即可融化，融化后8分钟内加入质粒，否则会影响转化效率。

2.混入质?；蛄硬锸庇η崛岵僮鳌?/p>

3.转化高浓度的质?；蚋咝实牧硬锟上嘤跎僮钪沼糜谕堪宓木俊?/p>