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基因型：

F-φ80 lac ZΔM15 Δ(lacZYA-arg F) U169 endA1 recA1hsdR17(rk-,mk+) supE44λ- thi -1 gyrA96 relA1

简要说明：

DH5α菌株是实验室常用的感受态细胞。 缺失核酸内切酶(endA)，提高了质粒DNA的产量和质量；重组酶缺陷型(recA)减少插入片段的同源重组概率，保证了插入DNA的稳定性；lacZΔM15的存在使DH5α可用于蓝、白斑筛选。DH5α菌株的缺点是生长缓慢，37℃需培12-14小时才能看见克??；如需加快试验速度，请选用TG1，Mach1-T1，XL10-Gold等生长速度快的感受态细胞。High5TM系列DH5α感受态细胞经特殊工艺制作，经pUC19质粒检测转化效率约1×109cfu/μg。

操作说明：

1. DH5α感受态细胞放置冰中融化（或放手心或室温片刻，待菌体处于冰水混合状态时迅速插入冰中），加入目的DNA（质?；蛄硬铮┎⒂檬纸链駿P管底轻轻混匀，冰上静置25分钟。

2.42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。

3.向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基（2YT或LB），混匀后37℃，200 rpm复苏60分钟。

4.5000rpm离心一分钟收菌，留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。

5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作，将平板放37℃培养至少17h。

注意事项：

1.感受态细胞最好在冰上融化。冰上放置大约5分钟即可融化，融化后8分钟内加入质粒,否则会影响转化效率。

2.混入质粒或连接产物时应轻柔操作。

3.转化高浓度的质?；蚋咝实牧硬锟上嘤跎僮钪沼糜谕堪宓木俊?/p>