人子宮成纖維原代細(xì)胞
| 參考價 | ￥1-￥580/件 |
- 公司名稱 上海研生實業(yè)有限公司
- 品牌上研生
- 型號
- 所在地上海市
- 廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
- 更新時間2025/5/16 8:42:56
- 訪問次數(shù) 16
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×10? |
|---|---|---|---|
| 貨號 | YS-01X7213 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
| 主要用途 | 僅供科研實驗 |
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細(xì)胞屬性：
方法簡介
公司實驗室分離的人子宮成纖維采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的人子宮成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 人子宮成纖維原代細(xì)胞 | 組織來源 | 子宮組織 |
英文名稱 | Human Uterine Fibroblast Cells | 貨號 | YS-01X7213 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細(xì)胞簡介：
人子宮成纖維細(xì)胞分離自子宮組織；子宮是孕育胎兒的器官，位于盆腔中部，膀胱與直腸之間，其位置可隨膀胱與直腸的充盈程度或體位而有變化。子宮的正常位置主要依靠子宮諸韌帶、盆膈、尿生殖膈及會陰中心腱等結(jié)構(gòu)維持，這些結(jié)構(gòu)受損或松弛時，可以引起子宮脫垂。成纖維細(xì)胞（Fibroblast）是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分，由胚胎時期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來；成纖維細(xì)胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動旺盛，細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細(xì)胞對不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的子宮成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細(xì)胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團(tuán)；細(xì)胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細(xì)胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細(xì)胞質(zhì)透明，細(xì)胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細(xì)胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。子宮成纖維細(xì)胞的主要特征：①是子宮的重要細(xì)胞組成，在體外易于培養(yǎng)；②在子宮損傷后能修復(fù)和重塑子宮；③在子宮炎癥時能有效控制炎癥擴(kuò)散。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞培養(yǎng)方法：
1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
公司產(chǎn)品：
mCF, 小鼠心臟成纖維細(xì)胞 小鼠雜交瘤細(xì)胞，7F2細(xì)胞 EL4. IL-2(淋巴瘤細(xì)胞) | ANGPTL5： 血管生成素相關(guān)蛋白5 0.2ml |
Anti-HPV 人類狀瘤病毒抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Rhesus antibody Rh AARS2 丙氨酰tRNA合成酶2抗體 規(guī)格 0.2ml |
Anti-phospho-CBL2(Tyr774) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠0酸化原癌蛋白CBL2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Rhesus antibody Rh ICAM-3/CD50 細(xì)胞間粘附分子-3抗體 規(guī)格 0.1ml |
APG4B/AUTL1 APG4B細(xì)胞自噬相關(guān)抗原 0.5mg | HSP47： 熱休克蛋白-47抗體 0.1ml |
IgG/RBITC 羅丹明標(biāo)記的羊抗小鼠IgG 0.3ml | Rhesus antibody Rh FAIM3 FAS凋亡抑制分子3抗體 規(guī)格 0.2ml |
人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;HCT-8 [HRT-18] | 293 人胚腎細(xì)胞 |
CL-0281HELF(人胚肺成纖維細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 | rRTEC, 大鼠腎小管上皮細(xì)胞 |
人肺間充質(zhì)干細(xì)胞RNAHPMSC miRNA5 μg | 中國倉鼠卵巢細(xì)胞K1(亞系克隆);CHO-K1 |
原代系膜細(xì)胞特制無血清添加劑Many types of cells包裝：1ml | 兔腎細(xì)胞;RK-13 |
A673細(xì)胞，橫紋肌瘤細(xì)胞 人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞,NCI-H838細(xì)胞 CL-0460U14-GFP(小鼠子細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 | 人子宮成纖維原代細(xì)胞Rhesus antibody Rh ICAM-3/CD50 細(xì)胞間粘附分子-3抗體 規(guī)格 0.1ml |
FIGF Protein Rat 重組大鼠 VEGF-D / VEGFD / FIGF 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) | NRN1L Others Human 人 NRN1L / neuritin 1-like / Cpg15-2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
犬腎細(xì)胞系/野生型;MDCK/wild | 人外根鞘細(xì)胞HHORSC |
MLF, 小鼠淋巴成纖維細(xì)胞 | Rhesus antibody Rh sIgA/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗人分泌型IgA 規(guī)格 0.1ml |
FA(Mouse Folic acid) ELISA Kit 小鼠 96T | CXCL12 Protein Human 重組人 CXCL12 / SDF-1 蛋白 |
ChRM1(muscarinic acetylcholine receptor) 毒蕈堿型乙酰受體M1抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg | F-TESTO(Human Free Testoterone) ELISA Kit 人游離睪酮Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
MrpL12： 線粒體核糖體蛋白L12抗體 0.1ml | 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;HCT-8 [HRT-18] |
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中，將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片，待細(xì)胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍(lán)。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
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