資料簡介
鏈霉親和素-巰基(Streptavidin-Thiol)是一種經(jīng)過化學修飾的鏈霉親和素,通過在其分子結構上引入巰基(-SH)功能團,使其能夠與其他分子或表面進行共價連接,廣泛應用于生物研究和診斷領域。
一、結構與性質(zhì)
結構:鏈霉親和素是一種高親和力的生物素結合蛋白,通過在其分子結構上引入巰基(-SH)功能團,形成鏈霉親和素-巰基。
性質(zhì):巰基具有較高的化學反應活性,能夠與多種含有親電基團的分子發(fā)生反應,如與馬來酰亞胺基團發(fā)生特異性的邁克爾加成反應,還能與金、銀等金屬表面形成穩(wěn)定的化學鍵。鏈霉親和素-巰基結合了鏈霉親和素的特異性和巰基的反應活性。
二、制備方法
鏈霉親和素純化:通常通過親和層析技術獲得高純度的鏈霉親和素。
巰基化試劑的選擇:常用的巰基化試劑包括N-(β-巰基乙基)-N’-(3-二甲基氨基丙基)-碳二亞胺(EDC)或NHS-巰基(NHS-thiol)。
化學反應:將鏈霉親和素與巰基化試劑在適宜的溶液體系中反應,pH控制在中性或弱堿性,以確保反應進行并避免非特異性反應。
反應條件優(yōu)化:控制反應溫度、時間及試劑的濃度,以促進巰基的引入。
純化巰基化鏈霉親和素:反應完成后,使用凝膠過濾或親和層析方法純化最終產(chǎn)物,去除未反應的試劑和副產(chǎn)物。
三、功能與應用
生物偶聯(lián)實驗:利用鏈霉親和素-巰基的巰基與修飾有馬來酰亞胺的生物分子或材料進行偶聯(lián),然后借助鏈霉親和素與生物素的結合,實現(xiàn)對目標生物分子的固定、分離或檢測。
表面修飾:可用于修飾金納米顆粒、電極、微孔板等,通過巰基與金等表面形成穩(wěn)定的共價鍵,從而改變這些表面的生物相容性和反應性。
免疫檢測與生物傳感:可與生物素標記物形成高親和力結合,用于ELISA、免疫熒光檢測等。
藥物遞送:通過巰基-馬來酰亞胺偶聯(lián),可將鏈霉親和素結合到納米顆?;蚩贵w上,實現(xiàn)靶向藥物遞送。
納米生物技術:用于金納米粒子、量子點表面的功能化修飾,廣泛用于生物成像和傳感器開發(fā)。
四、儲存與使用
儲存條件:鏈霉親和素-巰基應在低溫條件下儲存,如-20°C冷藏保存,以防止巰基氧化和蛋白質(zhì)變性。
使用范圍:僅用于科研,不能用于人體實驗。
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