将待检测抗体包被于96孔微孔板中,制成固相载体,向微孔中分别加入标准品或标本,其中的待检测指标与连接于固相载体上的抗体结合,然后加入生物素化的待检测抗体,将未结合的生物素化抗体洗净后,加入HRP标记的亲和素,再次*洗涤后加入TMB底物显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的待检测指标呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(O.D.值),计算样品浓度。
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