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二级生物安全柜广泛应用于微生物学、生物医学、基因工程、生物制品等领域的科研、教学、临床检验和生产中，是实验室生物安全中防护屏障中基本的安全防护设备。
如果使用不当，其防护作用就可能大大地受到影响。操作人员在移 动双臂进出安全柜时，需要小心维持前面开口处气流的完整性，双臂应该垂直 地缓慢进出前面的开口。
手和双臂伸入到生物安全柜中等待大约一分钟，以便安全柜调整完毕并且让里 面的空气"扫过"手和双臂的表面以后，才可以开始对物品进行处理。要在开 始实验之前将所有必须的物品置于安全柜内，以尽可能减少双臂进出前面开口 的次数。
物品放置二级生物安全柜前面的进气格栅不能被纸，仪器设备或其他物品阻挡。放入安 全柜内的物品应采用70%酒精来消除表面污染。可以在消毒剂浸湿的毛巾上进 行实验，以吸收可能溅出的液滴。
所有物品应尽可能地放在工作台后部靠近工作台边缘的位置，并使其在操作中 不会阻挡候补格栅?？刹芙旱纳璞福ɡ缁煸绕鳎胄幕龋┯拷踩?柜的后部放置。像有生物危害性的废弃物袋，盛放废弃吸管的盘子以及吸滤瓶 等体积较大的物品，应该放在安全柜内的某一侧。在工作台面上的实验操作应 该按照从清洁区到感染区的方向进行。 耐高压灭菌的生物危害性废弃物袋以及吸管盛放盘不应放在安全柜的外面，否 则在使用这些物品时双臂就必须频繁进出安全柜，这样会干扰安全柜空气屏障 的完整性，从而影响对人员和物品的防护。
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