游离脂肪酸（FFA）含量试剂盒（测植物组织）

微量法 100T/48S

游离脂肪酸FFA含量试剂盒

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定测定意义：

FFA 既是脂肪水解的产物，又是脂肪合成的底物。FFA 的浓度与脂类代谢、糖代谢、内分泌功能有关，也可反映食物贮藏中的品质变化。

测定原理：

在弱酸性条件下，FFA 与铜盐反应生成铜皂，在 715nm 处有特征吸收峰，在一定范围内游离脂肪酸含量与显色程度呈线性关系。

组成：

自备仪器和用品：

研钵、台式离心机、震荡仪、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板。

样品中 FFA 提?。?/span>

组织用蒸馏水冲洗干净后，用吸水纸吸取表面水分，捣碎后按照组织质量（g）：提取液体积(ml)为 1：5~10的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1ml 试剂一）加入试剂一，震荡提取 3h，8000g，4℃离心 10min，取上清液待测。

测定操作：

分光光度计/酶标仪预热 30 min，调节波长到 715 nm。

对照管：取上清液 0.4ml，加 0.2ml 试剂二，充分震荡 5min，室温静置 5min，取上层 200μl 于微量石英比色皿/96 孔板，调零。

测定管：取上清液 0.4ml，加 0.2ml 试剂三，充分震荡 5min，室温静置 5min，取上层 200μl 于微量石英比色皿/96 孔板，测定吸光值，记为A。

FFA 含量计算：

a. 使用微量石英比色皿测定的计算公式如下

标准曲线：y=0.0075 x+ 0.0055，R2=0.994

按样本蛋白浓度计算

FFA（nmol/mg prot）= (A-0.0055)÷0.0075×V1÷(V1×Cpr)=133×(A-0.0055)÷Cpr

按样本质量计算

FFA（nmol/g 鲜重）= (A-0.0055)÷0.0075×V1÷(V1÷V2×W)=133×(A-0.0055)÷W

V1：加入样本体积，0.4ml；V2：提取液体积，1ml；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/ml；W：样品质量，g。 b.使用 96 孔板测定的计算公式如下

标准曲线：y=0.0038 x+ 0.0055，R2=0.994

按样本蛋白浓度计算

FFA（nmol/mg prot）= (A-0.0055)÷0.0038×V1÷(V1×Cpr)=266×(A-0.0055)÷Cpr

按样本质量计算

FFA（nmol/g 鲜重）= (A-0.0055)÷0.0038×V1÷(V1÷V2×W)=266×(A-0.0055)÷W

V1：加入样本体积，0.4ml；V2：提取液体积，1ml； Cpr：样本蛋白质浓度，mg/ml；W：样品质量，g。

注意事项：

蛋白含量不可直接用提取的上清液直接测定，可用蒸馏水或缓冲液或生理盐水选用本公司的 BCA 法蛋白含量测定试剂盒。

最di检出限为 2 nmol/ml。

游离脂肪酸FFA含量试剂盒