蛋白質(zhì)下拉實(shí)驗(yàn)檢測(cè)技術(shù)服務(wù)詳情介紹

dànbáizhì下拉實(shí)驗(yàn)（Protein Pull-Down Assay）是廣泛用于研究dànbáizhì-dànbáizhì相互作用的技術(shù)，通過(guò)使用特定的標(biāo)記dànbáizhì捕捉與其相互作用的其他dànbáizhì，進(jìn)而分析dànbáizhì間的相互關(guān)系。dànbáizhì下拉實(shí)驗(yàn)主要用于驗(yàn)證dànbáizhì-dànbáizhì相互作用，鑒定與特定dànbáizhì結(jié)合的相互作用伙伴，甚至可以在一定程度上揭示其相互作用的親和力和結(jié)合特性。與酵母雙雜交、免疫共沉淀（Co-IP）等方法相比，dànbáizhì下拉實(shí)驗(yàn)在體外環(huán)境下進(jìn)行，能較為直接地捕獲dànbáizhì間的特異性相互作用。同時(shí)，因其操作簡(jiǎn)便、靈敏度高以及能夠揭示直接相互作用的優(yōu)勢(shì)，成為研究dànbáizhì-dànbáizhì相互作用的常用方法之一。它應(yīng)用于細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)、疾病機(jī)制研究、藥物靶點(diǎn)發(fā)現(xiàn)等領(lǐng)域。隨著質(zhì)譜技術(shù)和高通量數(shù)據(jù)分析的發(fā)展，dànbáizhì下拉實(shí)驗(yàn)逐漸向高通量篩選和全蛋白組水平的相互作用網(wǎng)絡(luò)分析邁進(jìn)。通過(guò)結(jié)合定量質(zhì)譜技術(shù)（如iTRAQ、TMT標(biāo)記），科研人員可以在更大范圍內(nèi)識(shí)別和分析dànbáizhì-dànbáizhì相互作用，揭示更多生物學(xué)意義。同時(shí)，利用dànbáizhì下拉實(shí)驗(yàn)與其他技術(shù)（如表面等離子體共振、免疫共沉淀）相結(jié)合，可以更全面地解析dànbáizhì相互作用的動(dòng)態(tài)過(guò)程。

一、dànbáizhì下拉實(shí)驗(yàn)的基本原理

dànbáizhì下拉實(shí)驗(yàn)的核心原理是利用一種標(biāo)記的“誘餌蛋白"（Bait Protein）作為固定化配體，通過(guò)與細(xì)胞裂解液或純化dànbáizhì溶液中的目標(biāo)蛋白相結(jié)合，隨后將結(jié)合復(fù)合物從溶液中分離并進(jìn)行檢測(cè)。誘餌蛋白通常與固相載體（如瓊脂糖珠、磁珠等）結(jié)合，常見(jiàn)標(biāo)記包括GST（gǔguānggāntàiS轉(zhuǎn)移酶）、His標(biāo)簽、FLAG標(biāo)簽等。

二、實(shí)驗(yàn)流程

1、固定化誘餌蛋白

將含有標(biāo)簽的誘餌蛋白固定在固相載體上。

2、孵育與結(jié)合

將目標(biāo)dànbáizhì（來(lái)源于細(xì)胞裂解液或純化dànbáizhì樣品）與固定化的誘餌蛋白孵育，使其發(fā)生結(jié)合。

3、洗滌

去除非特異性結(jié)合的dànbáizhì，確保僅保留特異性相互作用的dànbáizhì復(fù)合物。

4、洗脫與檢測(cè)

使用SDS-PAGE、Western Blot或質(zhì)譜分析等技術(shù)對(duì)下拉的dànbáizhì進(jìn)行鑒定和分析。

三、dànbáizhì下拉實(shí)驗(yàn)的應(yīng)用

1. 驗(yàn)證dànbáizhì-dànbáizhì相互作用

dànbáizhì下拉實(shí)驗(yàn)常用于驗(yàn)證在高通量篩選（如酵母雙雜交或免疫共沉淀）中發(fā)現(xiàn)的潛在相互作用伙伴。通過(guò)在體外進(jìn)行jīngquè定量分析，可以判斷兩種dànbáizhì之間是否存在直接相互作用。

2. 篩選新的結(jié)合伙伴

通過(guò)使用特定的誘餌蛋白，可以從復(fù)雜的細(xì)胞裂解液或組織樣本中捕獲新的結(jié)合dànbáizhì，幫助識(shí)別未知的dànbáizhì-dànbáizhì相互作用。

3. 分析dànbáizhì相互作用的結(jié)合域

通過(guò)構(gòu)建不同截短形式的誘餌蛋白或目標(biāo)蛋白，可以確定dànbáizhì之間相互作用的關(guān)鍵結(jié)構(gòu)域或氨基酸位點(diǎn)。

4. 研究相互作用的調(diào)控機(jī)制

dànbáizhì下拉實(shí)驗(yàn)還可以用于研究相互作用在不同生理?xiàng)l件（如不同pH值、離子濃度或藥物處理）下的變化，揭示調(diào)控機(jī)制。

四、dànbáizhì下拉實(shí)驗(yàn)的技術(shù)要點(diǎn)

1、誘餌蛋白的選擇

（1）確保誘餌蛋白是正確折疊的、具有生物活性的。

（2）合理選擇標(biāo)簽類型（如GST、His、FLAG等）和結(jié)合載體。

2、非特異性結(jié)合的控制

（1）設(shè)置適當(dāng)?shù)年幮詫?duì)照（如空載體或不含誘餌蛋白的載體）。

（2）優(yōu)化洗滌條件，減少非特異性結(jié)合。

3、dànbáizhì純化與洗滌

（1）純化dànbáizhì要確保較高的純度，避免其他dànbáizhì的干擾。

（2）洗滌步驟要足夠嚴(yán)格，以排除非特異性結(jié)合，同時(shí)避免過(guò)度洗滌導(dǎo)致目標(biāo)蛋白丟失。

百泰派克生物科技在dànbáizhì下拉實(shí)驗(yàn)領(lǐng)域擁有豐富的經(jīng)驗(yàn)和技術(shù)積累，能夠?yàn)榭蛻籼峁┤娴膁ànbáizhì相互作用研究解決方案。我們的服務(wù)包括實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)、dànbáizhì純化、誘餌蛋白固定化、下拉實(shí)驗(yàn)執(zhí)行以及后續(xù)的Western Blot或質(zhì)譜分析。無(wú)論是驗(yàn)證特定的dànbáizhì相互作用，還是進(jìn)行大規(guī)模的結(jié)合蛋白篩選，百泰派克都能夠提供高質(zhì)量的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)和科學(xué)見(jiàn)解，幫助科研人員加速研究進(jìn)程，揭示dànbáizhì相互作用的分子機(jī)制。

百泰派克生物科技特色項(xiàng)目

一、蛋白測(cè)序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質(zhì)譜儀及島津公司埃德曼降解測(cè)序系統(tǒng)對(duì)dànbáizhì序列進(jìn)行分析，提供基于質(zhì)譜的蛋白測(cè)序分析服務(wù)，包括對(duì)dànbáizhì的氨基酸組成分析，Nduāncèxù，Cduāncèxù和全序列分析，以及基于埃德曼降解的dànbáizhìN端序列分析服務(wù)。對(duì)于未知理論序列的dànbáizhì，提供基于從頭測(cè)序法的dànbáizhì從頭測(cè)序服務(wù)，對(duì)蛋白序列進(jìn)行分析。

※服務(wù)優(yōu)勢(shì)：

1.采用目前世界上*的質(zhì)譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可實(shí)現(xiàn)對(duì)所測(cè)定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;

3.可測(cè)定蛋白N端多達(dá) 70個(gè)氨基酸序列;

4.可測(cè)定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;

5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug，即可完成檢測(cè);

6.測(cè)序不受N端封閉，PEC和和糖基化等N端修飾的影響。

二、蛋白zhìzǔxué

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質(zhì)譜平臺(tái)結(jié)合Nano-LC，提供定量蛋白zhìzǔxué、bǎxiàngdàn白zhìzǔxué、多肽組學(xué)、翻譯后修飾蛋白組學(xué)等多種蛋白zhìzǔxué分析服務(wù)。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4D蛋白zhìzǔxué服務(wù)，助力微量樣本蛋白組學(xué)、大樣本群醫(yī)學(xué)及高通量修飾組學(xué)等研究工作。

※服務(wù)優(yōu)勢(shì)：

1 .高通量定量蛋白分析:多對(duì)照組大規(guī)模實(shí)驗(yàn)分析，發(fā)現(xiàn)新的生物標(biāo)記物;

2.體內(nèi)體外多種dànbáizhì標(biāo)記方法，適用于分析組織、細(xì)胞、血液等多種樣品;

3.質(zhì)譜分析靈敏度高，實(shí)驗(yàn)結(jié)果重復(fù)度高;

4.可檢測(cè)較低豐度蛋白，線性范圍廣;

5.zhuānyè生物信息學(xué)分析，分析更系統(tǒng)準(zhǔn)確。

三、單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm質(zhì)譜流式系統(tǒng)進(jìn)行單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析，采用金屬元素標(biāo)記物（通常是金屬元素標(biāo)記的特異抗體）標(biāo)記細(xì)胞表面和內(nèi)部的分子，然后用流式細(xì)胞原理分離單個(gè)細(xì)胞，再用電感耦合等離子體質(zhì)譜（ICP-MS）分析單個(gè)細(xì)胞的原子質(zhì)量譜，zuì后將原子質(zhì)量譜數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換為細(xì)胞表面和內(nèi)部的信號(hào)分子表達(dá)量。

※服務(wù)優(yōu)勢(shì)：

1.技術(shù)*，*技術(shù)空白

采用金屬標(biāo)記抗體技術(shù)，避免了傳統(tǒng)流式熒光通道少且易相互影響的問(wèn)題?？稍趩渭?xì)胞層面上對(duì)多種指標(biāo)同時(shí)進(jìn)行表征，百泰派克生物科技可做到同時(shí)檢測(cè)51個(gè)目標(biāo)蛋白。

2.分析數(shù)量大，成本較低

單細(xì)胞RNAseq受成本等因素限制，所有樣本細(xì)胞匯總的分析數(shù)目一般在2x10^4個(gè)左右，而流式質(zhì)譜技術(shù)一次（單樣本）就可分析至少10^5的細(xì)胞，實(shí)現(xiàn)了數(shù)量級(jí)的提高，且成本不高于單細(xì)胞RNAseq。

3.應(yīng)用前景大

①流式質(zhì)譜結(jié)果可以給出細(xì)胞亞群的變化，在臨床診斷、疾病機(jī)制研究等方面具有極大的研究前景；

②將金屬標(biāo)簽技術(shù)與其他技術(shù)結(jié)合會(huì)有新應(yīng)用方向。除常規(guī)蛋白外，質(zhì)譜流式細(xì)胞技術(shù)還可用于蛋白翻譯后修飾；

③可檢測(cè)細(xì)胞存活率、細(xì)胞大小、mRNA轉(zhuǎn)錄子表達(dá)量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)

百泰派克生物科技的基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)一站式解決方案包括我們專有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實(shí)現(xiàn)10,000個(gè)以上I型多肽和10,000個(gè)以上II型多肽的鑒定和識(shí)別。通過(guò)我們優(yōu)化的高通量免疫多肽組學(xué)分析平臺(tái)進(jìn)行免疫肽組學(xué)分析，可從zuì小的樣品材料中進(jìn)行可重復(fù)的識(shí)別和定量。該服務(wù)可以應(yīng)用于大規(guī)模的研究，旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案，深入挖掘未知的靶標(biāo)。

五、生物藥物表征

百泰派克基于高分辨率質(zhì)譜技術(shù)，MALDI TOF，高效色譜分離技術(shù)，提供一系列完善的生物藥物分析方案，從dànbáizhì、多肽、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級(jí)結(jié)構(gòu)分析，到產(chǎn)品變異性和純度分析。旨在提供優(yōu)質(zhì)生物藥物分析服務(wù)，幫助生物醫(yī)藥生產(chǎn)商提高生物藥物品質(zhì)。

百泰派克生物科技七大檢測(cè)平臺(tái)

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物質(zhì)譜多組學(xué)優(yōu)質(zhì)服務(wù)商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫(yī)療器械行業(yè)提供質(zhì)量控制檢測(cè)和項(xiàng)目驗(yàn)證等zhuānyè服務(wù)。公司實(shí)驗(yàn)室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法規(guī)和指導(dǎo)原則，通過(guò)CNAS/ISO9001雙重質(zhì)量體系認(rèn)證，建立了完備的質(zhì)量體系，數(shù)據(jù)冷熱/異地備份，設(shè)備定期計(jì)量/期間核查，軟件審計(jì)追蹤，為客戶提供一體化解決方案和技術(shù)服務(wù)，支持新藥研發(fā)、藥物申報(bào)注冊(cè)和生產(chǎn)放行。

1.公司采用ISO9001質(zhì)量控制體系，zhuānyè提供以質(zhì)譜為基礎(chǔ)的CRO檢測(cè)分析服務(wù)；

2.獲國(guó)家CNAS實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可，為客戶提供符合全球藥政法規(guī)的藥物質(zhì)量研究服務(wù)；

3.業(yè)務(wù)范圍覆蓋蛋白zhìzǔxué、多肽組學(xué)、代謝組學(xué)、生物藥物表征、單細(xì)胞分析、單細(xì)胞質(zhì)譜流式、生信云分析以及多組學(xué)生物質(zhì)譜整合分析等；

4.七大質(zhì)量控制檢測(cè)平臺(tái)，滿足您一站式服務(wù)需求；

5.服務(wù)3000+企業(yè)，10000+客戶的選擇；

6.致力于為您提供優(yōu)質(zhì)的生物質(zhì)譜分析服務(wù)!

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