RPA(Recombinase Polymerase Amplification)是一种等温性扩增技术，不需要复杂的设备和高温退火程序。RPA试剂盒中含有DNA引物、解旋酶、聚合酶、寡核苷酸等多种试剂，并且可以特异性地扩增目标DNA片段，同时还可以进行多样本检测。在RPA过程中，首先由引物和解旋酶使DNA双链断裂，然后DNA单链与引物特异性结合，并启动DNA聚合酶进行扩增反应，扩增产物可以通过电泳、实时荧光和拉曼光谱等方法进行检测和定量。RPA广泛应用于基因诊断、病原体检测、食品安全和环境监测等领域。

RPA试剂盒的主要组成部分是酶和试剂，其中酶对温度比较敏感，所以RPA试剂盒通常不耐高温。高温可导致酶的变性和活性损失，影响试剂盒的性能。

RPA试剂盒不耐高温的主要原因

1. 核酸聚合酶

RPA试剂盒中的核酸聚合酶对温度敏感，高温可导致其构象改变，失去活性，无法正常复制DNA模板。

2. 重组酶Recombinase

RPA试剂盒中的重组酶也对温度比较敏感，高温可破坏其二级结构和三级结构，失去识别DNA和催化重组的能力。

3. 单链RNA素

RPA试剂盒中的单链RNA素结构简单，但也对温度敏感，高温可破坏其结构，失去与核酸的特异性结合能力。

4. dNTP等

RPA试剂盒中的dNTP和其他试剂在高温下也更易降解，影响实验结果。

5. 酶的协同作用：

RPA试剂盒中多种酶之间需要协同作用实现DNA的複制和扩增，高温可干扰各酶间的作用，破坏其间的协同效应。