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詳細(xì)介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用，不直接用于食品、藥品、臨床或動(dòng)物的診斷或治療！
細(xì)胞屬性：
方法簡(jiǎn)介
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠脂肪間充質(zhì)干采用膠原酶消化法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠脂肪間充質(zhì)干經(jīng)CD29、CD44免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 小鼠脂肪間充質(zhì)干原代細(xì)胞 | 組織來(lái)源 | 脂肪組織 |
英文名稱 | Mouse Adipose-derived Mesenchymal Stem Cells | 貨號(hào) | YS-01X7434 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
小鼠脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞分離自脂肪組織；脂肪組織主要由大量群集的脂肪細(xì)胞構(gòu)成，聚集成團(tuán)的脂肪細(xì)胞由薄層疏松結(jié)締組織分隔成小葉；貯存的脂肪，在需要時(shí)可迅速分解成甘油和脂肪酸，經(jīng)血液輸送到各組織以供利用。它們影響胰島素敏感性、血壓水平、內(nèi)皮功能、纖溶活動(dòng)及炎癥反應(yīng)，參與多種重要病理生理過(guò)程；脂肪組織已由過(guò)去單純作為能量?jī)?chǔ)存的器官而成為一個(gè)極其重要的內(nèi)分泌系統(tǒng)。脂肪組織中也存在一些干細(xì)胞群，具有自我更新能力和多向分化潛能，被稱為脂肪組織來(lái)源的間充質(zhì)干細(xì)胞，簡(jiǎn)稱脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞。與骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞相比，在來(lái)源、細(xì)胞群特點(diǎn)以及分化潛能等多方面極為相似。但是，脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞更易獲得足夠數(shù)量的細(xì)胞，且獲取過(guò)程中對(duì)機(jī)體損傷更小，是更為理想的自體干細(xì)胞源。脂肪組織分離得到脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞以梭形為主要形態(tài)，BrdU可標(biāo)記其細(xì)胞核。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞培養(yǎng)方法：
1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個(gè)瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時(shí)間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。
公司產(chǎn)品：
6T-CEM人T細(xì)胞白血病細(xì)胞 The 6T-CEM of human T cell leukemia cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS | 核糖核酸酶6抗體 |
T細(xì)胞特異性趨化因子抗體 | 細(xì)胞外基質(zhì)蛋白FREM2抗體 |
錨蛋白重復(fù)域6抗體 | 電壓依賴性鈣通道Cav2.1抗體 |
腫瘤Nova1抗原抗體 | 青G抗體 |
血管緊張素Ⅱ-1型受體抗體 | 甲狀腺素T4抗體 |
FGFBP3 Protein Human 重組人 FGFBP3 蛋白 (His 標(biāo)簽) | CL-0141LLC-MK2(恒河猴腎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 |
B16-F1細(xì)胞，鼠黑色素瘤細(xì)胞系 血細(xì)胞瘤細(xì)胞系,Ramos細(xì)胞 倉(cāng)鼠/小鼠雜交瘤細(xì)胞;145-2C11 | AR42J(大鼠胰腺外分泌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 |
大鼠角膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL | IL18 Protein Human 重組人 IL18 / Ierleukin 18 / IGIF 蛋白 (GST 標(biāo)簽) |
大鼠肝星形細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL | 小鼠胰腺星狀細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL |
Hep3B人肝癌細(xì)胞 Hep3B human hepatocarcinoma cells DMEM+10% FBS | 小鼠脂肪間充質(zhì)干原代細(xì)胞電壓依賴性鈣通道Cav2.1抗體 |
蛋白酶(含100mL酶解緩沖液) 10mL | A7r5(大鼠胸大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 人腦血管平滑肌細(xì)胞HBVSMC |
人毛發(fā)基質(zhì)細(xì)胞(HHZMC)( 5×105 ) | CM-R041大鼠肝星形細(xì)胞培養(yǎng)基100mL |
IFNA5 Protein Rat 重組大鼠 IFNA5 / IFNaG 蛋白 (His 標(biāo)簽) | 調(diào)節(jié)蛋白1抗體 |
鈣調(diào)節(jié)素抗體（鈣調(diào)蛋白/鈣調(diào)素） | CL-0421RAG(小鼠腎腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 |
原鈣粘附蛋白α2抗體 | 酸脫氫酶激酶亞型2抗體 |
類免疫缺陷病毒2型抗體（艾滋病病毒） | FGFBP3 Protein Human 重組人 FGFBP3 蛋白 (His 標(biāo)簽) |
操作步驟：
1.將無(wú)菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中，將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片，待細(xì)胞長(zhǎng)至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過(guò)氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育：按照抗體說(shuō)明書(shū)稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽(yáng)性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍(lán)。
10. 封片：將中性樹(shù)膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
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