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10629ESHieff® T7 RNA Polymerase GMP-grade (low dsRNA
| 參考價(jià): | 面議 |
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)- 10629ES 產(chǎn)品型號(hào)
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問次數(shù)：39更新時(shí)間：2025-06-06 08:39:52
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產(chǎn)品簡介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥 |
|---|
產(chǎn)品介紹
產(chǎn)品詳情
產(chǎn)品介紹
本產(chǎn)品是大腸桿菌重組表達(dá)來源的噬菌體 T7 RNA 聚合酶，是對(duì)野生型T7進(jìn)行了改造優(yōu)化，突變得到的可以大幅度降低dsRNA含量的T7 RNA 聚合酶。以含有 T7 啟動(dòng)子序列的雙鏈 DNA 為模板，以 NTP 為底物，合成與啟動(dòng)子下游的反向單鏈 DNA 互補(bǔ)的RNA。雙鏈線性平末端或 5’突出末端 DNA均可作為 T7 RNA 聚合酶的底物模板，因此線性質(zhì)粒、PCR 產(chǎn)物均可用作體外合成 RNA 的模板。
本產(chǎn)品按照GMP規(guī)定生產(chǎn)，以液體形式提供。
產(chǎn)品特色
1. 高效低dsRNA合成
dsRNA含量顯著降低：與傳統(tǒng)T7 RNA聚合酶相比，dsRNA含量降低了至少10倍以上，有效避免了dsRNA引發(fā)的免疫激活和對(duì)mRNA功能的干擾。
高產(chǎn)量：mRNA產(chǎn)量穩(wěn)定在9mg/mL以上，滿足大規(guī)模生產(chǎn)的需要。
高完整度：轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物的完整度不低于野生型T7 RNA聚合酶，確保mRNA的質(zhì)量和功能。
2. 高效加帽與低投入
高加帽率：片段加帽率均超過99%，確保mRNA的穩(wěn)定性和翻譯效率。
低Cap analog投入量：在不同片段長度下，Cap analog投入量降低至2.5mM，仍能實(shí)現(xiàn)優(yōu)異的加帽率，顯著降低了生產(chǎn)成本。
3. 優(yōu)化的篩選與驗(yàn)證
雙重篩選策略：通過構(gòu)建隨機(jī)文庫與FADS高通量篩選方法，以及半理性設(shè)計(jì)與微孔板技術(shù)，篩選出超過10^6的隨機(jī)突變文庫，最終選出一款性能的突變體進(jìn)行商品化應(yīng)用。
產(chǎn)品特性：
| 來源 | 重組 E. coli |
| 最適溫度 | 37℃ |
| 活性 | 250 U/μL |
| 宿主核酸殘留 | <10 fg/U |
| 宿主蛋白殘留 | <50 ppm |
| RNA 酶殘留 | 陰性 |
| 儲(chǔ)存緩沖液 | 50mM Tris-HCl, 1 mM EDTA, 10 mM DTT, 100 mM NaCl, 0.1% Triton X-100，50%（v/v）甘油，pH7.9@25℃ |
| 活性單位定義 | 在 37℃、pH8.0 的條件下，1 h 內(nèi)使 1 nmol 的 [3H] GMP 摻入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定義為一個(gè)活性單位。 |
應(yīng)用案例
1、 在不同長度的應(yīng)用場(chǎng)景下，均能顯著性降低dsRNA 含量
| 片段長度 | T7 RNA pol | 產(chǎn)量（mg/mL） | 完整度（%） | dsRNA含量（(1ug RNA產(chǎn)生 ng的dsRNA) |
| 4K | T7-WT | 12.4 | 88.3 | 0.4273 |
| T7-低dsRNA | 12.1 | 89.9 | 0.0129 | |
| 競(jìng)品A | 11.0 | 87.8 | 0.0323 | |
| 9K | T7-WT | 9.5 | 81.9 | 2.9180 |
| T7-低dsRNA | 9.0 | 82.0 | 0.0379 | |
| 競(jìng)品A | 7.2 | 78.7 | 0.1805 |
2、Cap analog的投入量可以大幅降低
| Cap analog投入量（mM） | 加帽率（%）-4K | 1K | |
| WT | mutant | WT | |
| 10 | 100 | 100 | 100 |
| 5 | 100 | 100 | 100 |
| 2.5 | 100 | 100 | 99.7 |
在不同的片段長度，Cap analog的投入量降低到2.5mM， 仍能得到優(yōu)異的加帽率。同時(shí)在細(xì)胞層面上，也能得到優(yōu)異的表現(xiàn)（見下圖）
存儲(chǔ)條件
-25 ~ -15℃保存，有效期1年。
