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10628ESHieff® T7 RNA Polymerase (low dsRNA, 250 U/μL
參考價: 面議
具體成交價以合同協(xié)議為準
  • 10628ES 產(chǎn)品型號
  • Yeasen/翌圣生物 品牌
  • 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
  • 上海市 所在地

訪問次數(shù):43更新時間:2025-06-06 08:36:48

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產(chǎn)品簡介
供貨周期 現(xiàn)貨 應(yīng)用領(lǐng)域 生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥
本產(chǎn)品是大腸桿菌重組表達來源的噬菌體 T7 RNA 聚合酶,是對野生型T7進行了改造優(yōu)化,突變得到的可以大幅度降低dsRNA含量的T7 RNA 聚合酶。以含有 T7 啟動子序列的雙鏈 DNA 為模板,以 NTP 為底物,合成與啟動子下游的反向單鏈 DNA 互補的RNA。雙鏈線性平末端或 5’突出末端 DNA均可作為 T7 RNA 聚合酶的底物模板,因此線性質(zhì)粒、PCR 產(chǎn)物均可用作體外合成 RNA
產(chǎn)品介紹
產(chǎn)品詳情
產(chǎn)品介紹

本產(chǎn)品是大腸桿菌重組表達來源的噬菌體 T7 RNA 聚合酶,是對野生型T7進行了改造優(yōu)化,突變得到的可以大幅度降低dsRNA含量的T7 RNA 聚合酶。以含有 T7 啟動子序列的雙鏈 DNA 為模板,以 NTP 為底物,合成與啟動子下游的反向單鏈 DNA 互補的RNA。雙鏈線性平末端或 5’突出末端 DNA均可作為 T7 RNA 聚合酶的底物模板,因此線性質(zhì)粒、PCR 產(chǎn)物均可用作體外合成 RNA 的模板。

產(chǎn)品特色

1. 高效低dsRNA合成

dsRNA含量顯著降低:與傳統(tǒng)T7 RNA聚合酶相比,dsRNA含量降低了至少10倍以上,有效避免了dsRNA引發(fā)的免疫激活和對mRNA功能的干擾。

高產(chǎn)量:mRNA產(chǎn)量穩(wěn)定在9mg/mL以上,滿足大規(guī)模生產(chǎn)的需要。

高完整度:轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物的完整度不低于野生型T7 RNA聚合酶,確保mRNA的質(zhì)量和功能。


2. 高效加帽與低投入

高加帽率:片段加帽率均超過99%,確保mRNA的穩(wěn)定性和翻譯效率。

低Cap analog投入量:在不同片段長度下,Cap analog投入量降低至2.5mM,仍能實現(xiàn)優(yōu)異的加帽率,顯著降低了生產(chǎn)成本。


3. 優(yōu)化的篩選與驗證

雙重篩選策略:通過構(gòu)建隨機文庫與FADS高通量篩選方法,以及半理性設(shè)計與微孔板技術(shù),篩選出超過10^6的隨機突變文庫,最終選出一款性能的突變體進行商品化應(yīng)用。


產(chǎn)品特性:

來源重組 E. coli
最適溫度37℃
活性250 U/μL
宿主核酸殘留<10 fg/U
宿主蛋白殘留<50 ppm
RNA 酶殘留陰性
儲存緩沖液50mM Tris-HCl, 1 mM EDTA, 10 mM DTT, 100 mM NaCl, 0.1% Triton X-100,50%(v/v)甘油,pH7.9@25℃
活性單位定義在 37℃、pH8.0 的條件下,1 h 內(nèi)使 1 nmol 的 [3H] GMP 摻入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定義為一個活性單位。



應(yīng)用案例

1、 在不同長度的應(yīng)用場景下,dsRNA無論跟WT T7 ,還是競品,在保證其他指標不降的前提下,dsRNA 均有極顯著下降。

片段長度T7 RNA pol產(chǎn)量(mg/mL)完整度(%)dsRNA含量((1ug RNA產(chǎn)生 ng的dsRNA)
4KT7-WT12.488.30.4273
T7-低dsRNA12.189.90.0129
競品A11.087.80.0323
9KT7-WT9.581.92.9180
T7-低dsRNA9.082.00.0379
競品A7.278.70.1805

Hieff® T7 RNA Polymerase (low dsRNA, 250 U/μL)

Hieff® T7 RNA Polymerase (low dsRNA, 250 U/μL)

2、降低Cap analog的投入量,在不同的片段長度,以及與WT的對比下,投入量降低到2.5mM, 仍能得到優(yōu)異的加帽率。同時在細胞層面上,也能得到優(yōu)異的表現(xiàn)。

Cap analog投入量(mM)加帽率(%)-4K1K
WTmutantWT
10100100100
5100100100
2.510010099.7


存儲條件

-25 ~ -15℃保存,有效期1年。




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