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D-荧光素原理D-荧光素(D-Luciferin)是荧光素酶(Luciferase)的常用底物,普遍应用于整个生物技术领域,尤其是体内活体成像技术。其作用机制是在ATP和荧光素酶的作用下,荧光素(底物)能够被氧化发光。当荧光素过量时,产生的光量子数与荧光素酶的浓度呈正相关性(见下图)。将携带荧光素酶编码基因(Luc)的质粒转染入细胞后,导入研究动物如大、小鼠体内,之后注入荧光素,通过生物发光成像技术(BLI)来检测光强度变化,从而实时监测疾病发展状态或药物的治疗功效等。也可以利用ATP对此反应体
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转铁蛋白(Transferrin)------无血清细胞培养添加物背景介绍转铁蛋白又名运铁蛋白(Transferrin,TRF、Tf),负责运载由消化管吸收的铁和由红细胞降解释放的铁。以三价铁复合物(Tf-Fe3+)的形式进入骨髓中,供成熟红细胞的生成。转铁蛋白主要存在于血浆中,血浆中的转铁蛋白供应机体绝大部分组织的铁,而在其不能到达的部位,由这些组织自己合成的转铁蛋白在局部产生转铁作用。图1:转铁蛋白的结构人转铁蛋白(HumanTransferrin)主要在肝脏合成,是由位于同源N-端和C-端
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免疫球蛋白G(IgG)——模拟抗体活性,神似抗体结构免疫球蛋白免疫球蛋白(Ig)指具有抗体(Ab)活性或化学结构,与抗体分子相似的球蛋白。免疫球蛋白是由两条相同的轻链和两条相同的重链通过链间二硫键连接而成的四肽链结构。免疫球蛋白分为五类,即免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)、免疫球蛋白D(IgD)和免疫球蛋白E(IgE)。图1五类免疫球蛋白结构示意图IgG简介免疫球蛋白G(ImmunoglobulinG,IgG)是血清中免疫球蛋白主成分,约占血清中免疫球蛋白总
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qPCR常见问题及解决方案对于从事分子生物学研究的实验猿来说,RT-qPCR实验可谓是老生常谈了??此品缙嚼司?,只需“RNA提取-反转录-荧光定量”这些按部就班的操作,实则险象环生,一丁点的出错都有可能让我们怀疑人生。即便如此,在CNS的召唤下我们仍旧一遍遍的重复、重复、再重复。小翊深有体会,为此呕心沥血整理出来常用的SYBRGreen染料法RT-qPCR实验的几个常见问题,并给出了可能的原因和解决方案,希望大家能够顺利度过RT-qPCR大关。RT-qPCR实验中,大家或多或少会遇到扩增曲线异常
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抗体亲和纯化系列产品概述ProteinA、ProteinG是常应用于抗体亲和纯化和免疫沉淀的蛋白。将ProteinA、G分别固定在不同的介质上,或同时将ProteinA、G共价偶联到介质表面,是从腹水、细胞培养物上清和血清中分离IgG和IgG亚家族的有效工具。ProteinL源于细菌,能更广泛地结合各种类型以及亚类的免疫球蛋白,包括所有类型的IgG和单链可变区(ScFv)以及Fab片段。该蛋白只与抗体的kappa链结合而不会影响抗体的抗原结合位点,这一特性使其与蛋白A或蛋白G相比,能更广泛地结合
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Hifair Ⅲ 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR (gDNA digester plus)
Hifair®Ⅲ1stStrandcDNASynthesisSuperMixforqPCR(gDNAdigesterplus)——Yeasen第三代逆转录酶预混液,高质量cDNA的*!研发背景RT-qPCR是一个多步骤连贯实验,逆转录的实验结果只能通过后续qPCR进行判定,因此这一过程的成功与否十分关键。实验过程中,你是否有遇到过这些问题?1.逆转录效率低导致后续qPCR实验结果Ct值偏大?2.RNA具有复杂二级结构或GC含量高导致逆转录失败?3.逆转录产品组分多,加样麻烦误差还大?。。。。。。 -
【干货+试用】一文get核酸片段化酶知识要点近小翊在后台收到一封留言,说建库的片段化仪器坏了,不能做超声打断,问有没有其他核酸打断的方法推荐。核酸打断的方法可以分为机器法和试剂法。其中机器法包含接触式和非接触式,接触式主要包括探头式和水浴超声两大类,这类方法比较实惠,但是直接接触样本会导致样本损耗和污染,非接触式主要包括Diagennode和Covaris这两个品牌,这类仪器和耗材的成本太高,单个样本的耗材成本达20-50元。试剂法指的是采用片段化酶对核酸进行打断,这类方法成本较低,操作简便省时
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搞事情啊,翊圣请来了四位ECL超级魔术师??老板,都说你家ECL功能强,我给个飞克级的蛋白,能变出条带吗?办不到??老板,我多给点小费,把蛋白提高到皮克级,能不能变出条带?还是办不到??那也太差劲了,还想不想混了!不,小伙,你理解错了,是通通不是问题??!跟着我往下看!点亮您的印迹膜,一触即发ECL试剂,即化学发光法辣根过氧化物酶(HRP)底物,是目前Westernblotting检测中为灵敏的试剂。目前市场上普通ECL试剂在使用过程中经常出现易淬灭、高背景、不稳定以及低丰度蛋白难以检测等问题,影