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直接PCR——PCR反应中的快速之“王”
PCR技术是一种包括生命科学在内多个领域频繁使用的一种技术。而PCR技术在发展过程中有了几次大的技术革新,如热稳定Taq酶的发现、自动控温PCR仪的推出、PCR mix的出现,每一次革新的出现都使得PCR技术更加简便与易于操作。
Part1:直接PCR所谓何意?
直接PCR(Direct PCR)是一种不经核酸提取而直接使用动物或植物组织等直接进行扩增的反应。在许多方面,直接PCR的工作方式类似于常规PCR。主要区别是直接PCR中使用的定制缓冲液,样本可不经过核酸抽提,直接进行PCR反应,但对于参与直接PCR反应酶的耐受性和buffer的兼容性有相对应的要求。尽管常见的样品中或多或少都会存在PCR抑制剂,但在酶和buffer的作用下直接PCR仍可实现可靠的扩增。而传统的PCR反应需要以高质量的核酸为模板进行反应,如模板中含有蛋白以及其他杂质时就会抑制PCR反应的顺利进行。
Part2“直”接了当
核酸提取技术愈发成熟,对应所需要的配套仪器就越固化,技术的一体化导致单次的检测成果过高。而一些欠发达地区的并不具备成熟的核酸提取配套仪器及实验室,以及在性疾病流行大背景下,直接PCR的需求剧增。
目前的PCR检测方法所需时间较长,样品如咽拭子、血液等需经核酸提取后再进行检测及报告发放,整体拉长了诊断时间。直接PCR使用简单,不需要额外培训专业的检测人员,可直接将样品简单稀释即可同时还避免了因如核酸提取操作等出现的假阴性结果。
Part 3: 状况“直”出
早在1993年之前,直接PCR就被用于微生物领域中分析中,今天分子实验室中所采用的菌落PCR鉴定就是直接PCR法的直接的体现。可直接样品简单处理或者稀释即可进行PCR反应。
2019年新///冠病毒出现,并且迅速席卷造成重大损失。随后非洲猪瘟又卷土重来,造成生猪产业的重大损失。想要控制疫情,检测是重中之重。而在此次的疫情期间,分子检测揭开了其神秘的面纱进入人们的视野中。一方面是疫情期间分子检测的需求攀升,另一方面是攀升的需求使得卫生机构的运行负荷骤增。因此开发快速检测技术是各家IVD企业争相抢夺的高地。而直接PCR更是快速分子检测技术中的一匹黑马。
直接PCR的核心就是具有高度耐受的聚合酶,可直接对样本中的核酸分子进行检测。翊圣生物研发的直接PCR系列具有优////秀的耐受抑制组分,有针对不同样品如动物组织、动物全血等PCR产品,助力快速检测。
产品名称 | 货号 | 规格 |
Animal Blood Direct PCR Kit (With Dye) 全血直接PCR试剂盒 | 10186ES50/70 | 50/200 T |
2×Hieff Unicon® Blood Direct TaqMan SNP Genotyping Kit 荧光定量血液直扩TaqMan SNP分型预混试剂盒 | 13100ES60 | 100 T |
2×Hieff® C2P3 Blood Direct TaqMan qPCR Master Mix血液直扩荧光定量试剂盒 | 13094ES10 | 10 mL |
2×Hieff® C38P1 Blood Direct Multiplex PCR Master Mix 2×C38P1血液直扩多重PCR预混液 | 13187ES08 | 5 mL |
HB200910