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翌圣生物科技(上海)股份有限公司

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翊圣生物全能核酸酶Benzonase Nuclease

2020-5-8  阅读(1032)

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翊圣生物全能核酸酶Benzonase Nuclease

——核酸消除

翊圣生物研发团队利用—流的基因工程改造技术,研制而成的核酸去除的全能核酸酶,既保证了产品的纯度与酶活,又确保了产品的稳定性,目标客户攘括工业端与科研端两大科学研究链,可满足广大生物研究者的基本需求。


翊圣核酸酶,严格把控,品质优先

1、质检项目

货号

表达宿主

活性

内毒素

浓度

纯度SDS-PAGE

纯度SEC-HPLC

细菌检测

蛋白酶检测

翊圣20125(工业)

酵母菌

翊圣20156(科研)

大肠杆菌





2、质检结果


核酸酶*特性


特性一:耐受性强

能够与多种细胞裂解液同时使用,如RIPA;与含有多种离子和非离子型去污剂、还原剂的蛋白提取试剂等兼容。

试剂

耐受剂量

耐受程度

盐酸胍

>100 mM

*抑制Benzonase活性

EDTA

1 mM

部分抑制Benzonase活性

5 mM

活性丧失90%

PMSF

1 mM

不会抑制Benzonase活

Triton® X-100

浓度<0.4%

保持70%的活性

浓度<0.4%<1%

活性急剧降低

浓度1%

性丧失70%

SDS

浓度在0.1%~1%

活性急剧降低

尿素

>6 M

活性急剧降低


特性二:操作简易,轻松使用

1、推荐使用条件

条件参数

*条件

有效条件

Mg2+

1-2 mM

1-10 mM

pH

8-9

6-10

温度

37℃

0-42℃

DTT

0-100 mM

>0 mM

巯基乙醇

0-100 mM

>0 mM

单价阳离子

0-20 mM

0-150 mM

磷酸根离子

0-10 mM

0-100 mM

2、推荐使用量

实验类型

蛋白电泳样品

药物生产-1g

疫苗、病毒生产-1L

细胞培养-1L

推荐产品

Benzonase科研级,20156

Benzonase无内毒素级,20125

要求

125 U0.5 µL

25 U/mL1 µL

0.1 U/mL0.4 µL

0.1 U/mL0.4 µL

建议用量

500 U2 µL

250 U/mL10 µL

25 U/mL100 µL

5 U/mL20 µL

孵育时间

通常作用时间37℃在15~60 min;25℃在30~120 min;

:以上仅仅是推荐,可根据实验自主摸索*实验条件。


助阵四方,应用甚广

应用1,除去生物制品中的DNA/RNA

全能核酸酶可用于疫苗、多糖、蛋白等工业生物制品中核酸的去除,使生物制品的终核酸含量符合要求,同时提高生物制品功效。并且研究者提供了一种可获得HIV测序文库的方案HIV-SMART,其中全能核酸酶的运用,可显著提高HIV病毒测序覆盖度,且不影响病毒核酸的回收率。

3 (+)添加和(-)不添加全能核酸酶处理的CHU1756NGS覆盖图[1]

应用2,用于降低细胞破碎后的粘度

全能核酸酶可以降解所有形式的核酸,降低细胞裂解液的粘度,提高蛋白得率,改善分离效果,使之易于过滤(尤其是超滤),利于下游层析纯化操作。

4 细胞裂解液Benonase处理(A)和未处理(B)比较图

应用3,生化分析样品的制备

在ELISA、色谱分析、双相电泳和足迹分析等过程中,用全能核酸酶处理含有核酸的蛋白样品,可提高分辨率,并提高回收率。

5  小鼠脑核蛋白Benonase处理(A)和未处理(B)双向电泳比较图[2]

应用4,CAR-T治疗相关行业(慢病毒包装)

FAQ——如何摆脱后续核酸酶干扰?

措施1采用EDTA螯合金属离子会可逆地抑制全能核酸酶活性,条件会造成不可逆失活,例如100 mM NaOH,70℃处理30 min等;

措施2对于带某种标签的Benzonase核酸酶可通过相应的标签蛋白纯化树脂直接去除,去除率>95%;

措施3对于不带标签的Benzonase核酸酶,可通过色谱纯化去除核酸酶,然后可通过检测残留活性或ELISA检测来判断去除是否成功。


产品订购信息

产品名称

货号

规格

价格(元)

Benzonase Nuclease全能核酸酶

20156ES25

25 KU

418

20156ES50

50 KU

768

20156ES60

100 KU

1398

Benzonase Nuclease (Endotoxin-free)?

全能核酸酶无内毒素

20125ES25

25 KU

1125

20125ES50

50 KU

1965

20125ES60

100 KU

3245


文献引用

[1] Berg M G, Yamaguchi J, Alessandri-Gradt E, et al. A pan-HIV strategy for complete genome sequencing[J]. Journal of clinical microbiology, 2016, 54(4): 868-882.

[2] Jankowska U, Latosinska A, Skupien-Rabian B, et al. Optimized procedure of extraction, purification and proteomic analysis of nuclear proteins from mouse brain[J]. Journal of neuroscience methods, 2016, 261: 1-9.


HB200509


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