介绍几种常用的转染方法!
阅读:2088 发布时间:2012-10-18
常用的转染方法有如下几种:
(1)磷酸钙(calcium phosphate),
(2)DEAE-dextran,
(3)脂小体(liposome),
(4)电穿孔(electroporation),
(5)显微注射(microinjection),
(6)病毒感染(retrovirus infection),
(7)基因qiang(gene-gun)等。
前两项方法是以化学物质创造一个化学反应环境,让DNA附着到动物细胞之表面,然后DNA被动物细胞所吞噬。以脂小体为媒介的方式,其主要机制虽不全然清楚,
但DNA带负电之磷酸根会与脂小体表面之正电荷结合,脂小体带正电荷的部分又会与细胞表面带负电荷的唾液酸(sialic acid)结合,藉以进行转染。电穿孔则藉电流方式进行。
显微注射是在显微镜的帮助下,直接以微细针管将物质穿刺细胞打入。病毒感染是利用多种不同的病毒特性,将DNA改造成病毒的一部份,另外病毒本身致癌基因或有害人类健康的基因也加以改造,再藉病毒感染方式送入基因。
基因qiang是一种粒子qiang法(microprojectile bombardment),欲送入的基因可涂裹在细微的粒子zhidan上,再被推压如散dan方式射入目标细胞或组织中。除以上所提七种方式外,在植物基因转殖(transgenic plant)上,另可利用农杆菌媒介(Agrobacterium-mediated)方式,首先把基因接上载体,再把载体导入农杆菌,藉由农杆菌为媒介,把外来基因导入植物细胞。
参考资料:
http://www.bjsgyq.com/