基于標(biāo)記的糖蛋白質(zhì)組學(xué)定量策略全解析檢測(cè)技術(shù)服務(wù)詳情介紹

糖蛋白廣泛分布于哺乳動(dòng)物細(xì)胞表面及胞外環(huán)境，在細(xì)胞識(shí)別、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、免疫應(yīng)答等過(guò)程中發(fā)揮核心作用。糖基化修飾的動(dòng)態(tài)變化已被證實(shí)與多種疾病密切相關(guān)，尤其在腫瘤、神經(jīng)退行性疾病及炎癥反應(yīng)中，糖蛋白的表達(dá)與功能呈現(xiàn)出高度異質(zhì)性。因此，實(shí)現(xiàn)糖dànbáizhì組的高通量定量，對(duì)于深入理解其生物學(xué)意義具有重要價(jià)值。

一、糖dànbáizhì組定量的核心挑戰(zhàn)

糖dànbáizhì組研究面臨多個(gè)技術(shù)瓶頸：糖基化修飾具有結(jié)構(gòu)異質(zhì)性且豐度低，難以直接在復(fù)雜樣本中檢測(cè)；富集步驟易引入非特異性背景；糖肽在質(zhì)譜分析中易出現(xiàn)碎裂效率低、信號(hào)抑制等問(wèn)題。為實(shí)現(xiàn)準(zhǔn)確、可重復(fù)的定量分析，需要構(gòu)建高效、穩(wěn)定的技術(shù)流程。

二、基于標(biāo)記的定量策略概覽

基于標(biāo)記的定量策略通過(guò)在不同樣本中引入可區(qū)分的質(zhì)量標(biāo)簽，使多個(gè)條件下的糖蛋白在單次質(zhì)譜分析中實(shí)現(xiàn)jīngquè比較。按標(biāo)記方式分類，主要包括同位素代謝標(biāo)記、肽段化學(xué)標(biāo)記兩大類。

1、同位素代謝標(biāo)記（SILAC）

SILAC通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)階段引入含穩(wěn)定同位素的氨基酸，實(shí)現(xiàn)蛋白層面的內(nèi)源性標(biāo)記。標(biāo)記后的細(xì)胞可直接用于蛋白提取、糖肽富集及質(zhì)譜分析，避免了人工化學(xué)修飾帶來(lái)的變異。

• 優(yōu)勢(shì)：標(biāo)記效率高，樣本間變異小，適用于動(dòng)態(tài)糖蛋白表達(dá)研究。

• 局限：僅適用于可培養(yǎng)細(xì)胞，對(duì)組織、血清等樣本不適用。

2、肽段化學(xué)標(biāo)記（TMT/iTRAQ等）

該類策略通過(guò)與肽段N端或賴氨酸殘基反應(yīng)引入質(zhì)量標(biāo)簽，允許zuì多16個(gè)樣本同時(shí)進(jìn)行定量比較。該方法適用于大多數(shù)樣本類型，特別適合大規(guī)模生物標(biāo)本的平行分析。

• 優(yōu)勢(shì)：通量高，適配性強(qiáng)，可同時(shí)進(jìn)行定性與定量分析。

• 局限：標(biāo)簽間串?dāng)_（ratio compression）可能導(dǎo)致低豐度糖肽定量偏差，需借助高分辨質(zhì)譜和優(yōu)化方法進(jìn)行糾正。

3、其他化學(xué)標(biāo)記方法

如二甲基標(biāo)記（Dimethyl Labeling）、DiLeu等策略以更低成本實(shí)現(xiàn)多樣本定量，適用于需要靈活適配不同質(zhì)譜平臺(tái)的研究場(chǎng)景。這類方法在確保定量精度的同時(shí)，也可根據(jù)研究需求靈活調(diào)整樣本通量和標(biāo)記方案。

三、糖肽富集策略與biāojìdìng量的協(xié)同優(yōu)化

由于糖肽在樣本中豐度極低，需在定量前進(jìn)行有效富集。常用富集技術(shù)包括：

• Lectin親和富集：依賴凝集素識(shí)別特定糖結(jié)構(gòu)，選擇性高；

• HILIC富集：利用糖肽疏水性差異進(jìn)行選擇性保留；

• TiO?富集：可用于O-糖肽和富含羧基結(jié)構(gòu)的糖肽捕獲。

不同定量策略對(duì)富集順序和方法有不同要求。例如，在TMT標(biāo)記流程中建議“標(biāo)記后富集”，以減少干擾反應(yīng)和非特異性修飾；而在SILAC體系中，由于蛋白已內(nèi)源性標(biāo)記，富集順序可更為靈活。為提高定量準(zhǔn)確性，推薦使用混合碎裂模式（HCD與EThcD）聯(lián)合采集，提升糖肽結(jié)構(gòu)解析能力；同時(shí)應(yīng)選用具備糖基化識(shí)別能力的數(shù)據(jù)庫(kù)搜索引擎，結(jié)合定量校正算法進(jìn)行后處理。

四、應(yīng)用場(chǎng)景與未來(lái)展望

基于標(biāo)記的糖dànbáizhì組定量策略已廣泛應(yīng)用于以下研究方向：

• 腫瘤生物標(biāo)志物篩選：挖掘癌組織與正常組織間的差異性糖基化模式；

• 免疫系統(tǒng)調(diào)控機(jī)制研究：探索免疫細(xì)胞表面糖蛋白在激活與抑制過(guò)程中的動(dòng)態(tài)變化；

• 藥物靶點(diǎn)驗(yàn)證與機(jī)制解析：在受體識(shí)別與信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)環(huán)節(jié)中定位關(guān)鍵糖蛋白分子。

隨著質(zhì)譜靈敏度提升、糖肽數(shù)據(jù)庫(kù)完善及數(shù)據(jù)分析算法優(yōu)化，糖dànbáizhì組學(xué)的定量研究將更趨jīngzhǔn與高效。未來(lái)，這一技術(shù)有望在疾病早篩、jīngzhǔn醫(yī)療、生物藥開(kāi)發(fā)等領(lǐng)域?qū)崿F(xiàn)更廣泛的轉(zhuǎn)化應(yīng)用。

基于標(biāo)記的糖dànbáizhì組定量策略正逐步成為解析復(fù)雜生物過(guò)程的關(guān)鍵技術(shù)之一。百泰派克生物科技提供覆蓋SILAC、TMT等多類型標(biāo)簽策略的一站式糖dànbáizhì組定量服務(wù)。通過(guò)整合高效標(biāo)記體系、jīngzhǔn富集方法與*質(zhì)譜平臺(tái)，我們致力于為科研人員與生物醫(yī)藥企業(yè)提供高質(zhì)量的服務(wù)，助力科研成果向臨床轉(zhuǎn)化邁進(jìn)。如您正在探索糖dànbáizhì組的研究方案，歡迎聯(lián)系我們，獲取zhuānyè咨詢與項(xiàng)目支持。

百泰派克生物科技特色項(xiàng)目

一、蛋白測(cè)序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質(zhì)譜儀及島津公司埃德曼降解測(cè)序系統(tǒng)對(duì)dànbáizhì序列進(jìn)行分析，提供基于質(zhì)譜的蛋白測(cè)序分析服務(wù)，包括對(duì)dànbáizhì的氨基酸組成分析，Nduāncèxù，Cduāncèxù和全序列分析，以及基于埃德曼降解的dànbáizhìN端序列分析服務(wù)。對(duì)于未知理論序列的dànbáizhì，提供基于從頭測(cè)序法的dànbáizhì從頭測(cè)序服務(wù)，對(duì)蛋白序列進(jìn)行分析。

※服務(wù)優(yōu)勢(shì)：

1.采用目前世界上*的質(zhì)譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可實(shí)現(xiàn)對(duì)所測(cè)定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;

3.可測(cè)定蛋白N端多達(dá) 70個(gè)氨基酸序列;

4.可測(cè)定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;

5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug，即可完成檢測(cè);

6.測(cè)序不受N端封閉，PEC和和糖基化等N端修飾的影響。

二、dànbáizhì組學(xué)

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質(zhì)譜平臺(tái)結(jié)合Nano-LC，提供定量dànbáizhì組學(xué)、靶向dànbáizhì組學(xué)、多肽組學(xué)、翻譯后修飾蛋白組學(xué)等多種dànbáizhì組學(xué)分析服務(wù)。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4Ddànbáizhì組學(xué)服務(wù)，助力微量樣本蛋白組學(xué)、大樣本群醫(yī)學(xué)及高通量修飾組學(xué)等研究工作。

※服務(wù)優(yōu)勢(shì)：

1 .高通量定量蛋白分析:多對(duì)照組大規(guī)模實(shí)驗(yàn)分析，發(fā)現(xiàn)新的生物標(biāo)記物;

2.體內(nèi)體外多種dànbáizhì標(biāo)記方法，適用于分析組織、細(xì)胞、血液等多種樣品;

3.質(zhì)譜分析靈敏度高，實(shí)驗(yàn)結(jié)果重復(fù)度高;

4.可檢測(cè)較低豐度蛋白，線性范圍廣;

5.zhuānyè生物信息學(xué)分析，分析更系統(tǒng)準(zhǔn)確。

三、單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm質(zhì)譜流式系統(tǒng)進(jìn)行單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析，采用金屬元素標(biāo)記物（通常是金屬元素標(biāo)記的特異抗體）標(biāo)記細(xì)胞表面和內(nèi)部的分子，然后用流式細(xì)胞原理分離單個(gè)細(xì)胞，再用電感耦合等離子體質(zhì)譜（ICP-MS）分析單個(gè)細(xì)胞的原子質(zhì)量譜，zuì后將原子質(zhì)量譜數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換為細(xì)胞表面和內(nèi)部的信號(hào)分子表達(dá)量。

※服務(wù)優(yōu)勢(shì)：

1.技術(shù)*，*技術(shù)空白

采用金屬標(biāo)記抗體技術(shù)，避免了傳統(tǒng)流式熒光通道少且易相互影響的問(wèn)題?？稍趩渭?xì)胞層面上對(duì)多種指標(biāo)同時(shí)進(jìn)行表征，百泰派克生物科技可做到同時(shí)檢測(cè)51個(gè)目標(biāo)蛋白。

2.分析數(shù)量大，成本較低

單細(xì)胞RNAseq受成本等因素限制，所有樣本細(xì)胞匯總的分析數(shù)目一般在2x10^4個(gè)左右，而流式質(zhì)譜技術(shù)一次（單樣本）就可分析至少10^5的細(xì)胞，實(shí)現(xiàn)了數(shù)量級(jí)的提高，且成本不高于單細(xì)胞RNAseq。

3.應(yīng)用前景大

①流式質(zhì)譜結(jié)果可以給出細(xì)胞亞群的變化，在臨床診斷、疾病機(jī)制研究等方面具有極大的研究前景；

②將金屬標(biāo)簽技術(shù)與其他技術(shù)結(jié)合會(huì)有新應(yīng)用方向。除常規(guī)蛋白外，質(zhì)譜流式細(xì)胞技術(shù)還可用于蛋白翻譯后修飾；

③可檢測(cè)細(xì)胞存活率、細(xì)胞大小、mRNA轉(zhuǎn)錄子表達(dá)量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)

百泰派克生物科技的基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)一站式解決方案包括我們專有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實(shí)現(xiàn)10,000個(gè)以上I型多肽和10,000個(gè)以上II型多肽的鑒定和識(shí)別。通過(guò)我們優(yōu)化的高通量免疫多肽組學(xué)分析平臺(tái)進(jìn)行免疫肽組學(xué)分析，可從zuì小的樣品材料中進(jìn)行可重復(fù)的識(shí)別和定量。該服務(wù)可以應(yīng)用于大規(guī)模的研究，旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案，深入挖掘未知的靶標(biāo)。

五、生物藥物表征

百泰派克基于高分辨率質(zhì)譜技術(shù)，MALDI TOF，高效色譜分離技術(shù)，提供一系列完善的生物藥物分析方案，從dànbáizhì、多肽、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級(jí)結(jié)構(gòu)分析，到產(chǎn)品變異性和純度分析。旨在提供優(yōu)質(zhì)生物藥物分析服務(wù)，幫助生物醫(yī)藥生產(chǎn)商提高生物藥物品質(zhì)。

百泰派克生物科技七大檢測(cè)平臺(tái)

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物質(zhì)譜多組學(xué)優(yōu)質(zhì)服務(wù)商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫(yī)療器械行業(yè)提供質(zhì)量控制檢測(cè)和項(xiàng)目驗(yàn)證等zhuānyè服務(wù)。公司實(shí)驗(yàn)室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法規(guī)和指導(dǎo)原則，通過(guò)CNAS/ISO9001雙重質(zhì)量體系認(rèn)證，建立了完備的質(zhì)量體系，數(shù)據(jù)冷熱/異地備份，設(shè)備定期計(jì)量/期間核查，軟件審計(jì)追蹤，為客戶提供一體化解決方案和技術(shù)服務(wù)，支持新藥研發(fā)、藥物申報(bào)注冊(cè)和生產(chǎn)放行。

1.公司采用ISO9001質(zhì)量控制體系，zhuānyè提供以質(zhì)譜為基礎(chǔ)的CRO檢測(cè)分析服務(wù)；

2.獲國(guó)家CNAS實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可，為客戶提供符合全球藥政法規(guī)的藥物質(zhì)量研究服務(wù)；

3.業(yè)務(wù)范圍覆蓋dànbáizhì組學(xué)、多肽組學(xué)、代謝組學(xué)、生物藥物表征、單細(xì)胞分析、單細(xì)胞質(zhì)譜流式、生信云分析以及多組學(xué)生物質(zhì)譜整合分析等；

4.七大質(zhì)量控制檢測(cè)平臺(tái)，滿足您一站式服務(wù)需求；

5.服務(wù)3000+企業(yè)，10000+客戶的選擇；

6.致力于為您提供優(yōu)質(zhì)的生物質(zhì)譜分析服務(wù)!

基于標(biāo)記的糖蛋白質(zhì)組學(xué)定量策略全解析檢測(cè)技術(shù)服務(wù)詳情介紹