電壓依賴性鈣通道蛋白抗體

1.特異性——免疫原

用于產(chǎn)生抗體的免疫原類型顯著影響抗體對靶蛋白的特異性。選擇針對不合適或質(zhì)量差的免疫原產(chǎn)生的抗體將導(dǎo)致不可靠且可能無法重現(xiàn)的結(jié)果。應(yīng)注意選擇針對已充分表征的免疫原產(chǎn)生的抗體。

2.肽

合成肽免疫原很少折疊成天然蛋白質(zhì)的類似三級結(jié)構(gòu)。此外，除非在合成過程中添加到肽中，否則它們不會表現(xiàn)出任何翻譯后修飾。因此，使用肽產(chǎn)生的抗體可用作蛋白質(zhì)印跡的有用試劑，因?yàn)橛捎跇悠诽幚磉^程中的變性和還原，靶蛋白具有線性化的表位。當(dāng)抗體需要區(qū)分具有高度保守氨基酸序列的兩種蛋白質(zhì)時(shí)，肽也可用作免疫原。在這些情況下，產(chǎn)生到差異區(qū)域的肽增加了制造差異抗體的可能性。

3.天然蛋白質(zhì)

如果將純化的蛋白質(zhì)用作免疫原，則針對它們產(chǎn)生的抗體可能無法識別蛋白質(zhì)印跡中變性蛋白質(zhì)的線性表位。一些使用天然蛋白質(zhì)產(chǎn)生的抗體只能識別蛋白質(zhì)表面的天然氧化構(gòu)象表位。對于單克隆抗體尤其如此。

Voltage-gated Ca(2+) and Na+ channels have 4 homologous domains, each containing 6 transmembrane segments, S1 to S6. TPCN1 is similar to these channels, but it has only 2 domains containing S1 to S6

1、制備抗原。

2、選擇實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。

3、動(dòng)物免疫。

4、試取血進(jìn)行測試，看看是否成功免疫。

5、如果成功免疫，殺死實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，采集全部血清。

6、純化出抗體。

7、鑒定抗體。包括純度以及特異性。
一）抗原制備

Ig 是免疫球蛋白，對異種動(dòng)物而言，是良好的抗原物質(zhì)?？梢源碳ぎ惙N動(dòng)物產(chǎn)生抗 Ig 血清，

經(jīng)適當(dāng)提取后，產(chǎn)生抗 Ig 抗體，又叫第二抗體或抗抗體。在多數(shù)的間接標(biāo)記反應(yīng)中，均需制備

抗 Ig 抗體。

（二）材料與試劑

1．提取的動(dòng)物 Ig

2．弗氏佐劑和弗氏不佐劑

3．實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔

4．其它材料及試劑

通用型組織對氧磷酶1（PON1）有機(jī)磷酸酶活性熒光定量檢測試劑盒

通用型微型RNA（miRNA）定量擴(kuò)增分析試劑盒

地生蘭（terrestrial）移植維護(hù)培養(yǎng)基

冰凍切片組織JNK/SAPK蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒

通用型灰斑病灰梨孢菌（Grey Leaf Spot Pyricularia grisea）

體液尿素比色法定量檢測試劑盒

組織游離酶連續(xù)循環(huán)熒光定量檢測試劑盒

細(xì)胞組織型纖維蛋白溶酶原激活劑（tPA）活性熒光定量檢測試劑盒

組織甘肽（GLUTATHIONE）總濃度熒光定量檢測試劑盒

腸桿菌EE營養(yǎng)肉湯

冰凍切片組織BAX蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒

食物果膠酶比色法定量檢測試劑盒

M. intracellulare RFLP基因分析試劑盒

細(xì)胞PKCβ2激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）

細(xì)菌β-半乳糖苷酶活性超敏熒光定量檢測試劑盒

致癌基因抗體

谷受體2A重組兔單克隆抗體

溶血磷脂酶樣蛋白1抗體

MAGOH蛋白抗體

細(xì)胞質(zhì)PSD95相互作用因子抗體

艾滋病病毒復(fù)制結(jié)合蛋白抗體

磷酸核糖胺咪唑羧化酶抗體

電壓依賴性鈣通道蛋白抗體CBP Tag標(biāo)簽抗體