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BY-1296 BHK-21 C-13仓鼠肾成纤维细胞系

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BHK-21 [C-13]仓鼠肾成纤维细胞系
BHK-21 [C-13]仓鼠肾成纤维细胞系是 BHK-21 细胞家族中经克隆纯化的亚系,源自叙利亚仓鼠幼鼠的肾脏成纤维组织,因遗传均一性高、病毒敏感性强及培养稳定性优异,成为病毒学研究与疫苗生产的经典模型。其在保留原始 BHK-21 细胞优势的基础上,通过克隆筛选进一步提升了细胞的均一性与实验重复性,在科研与工业领域应用广泛。
一、细胞基本特性
  • 来源与形态:该细胞系源自 BHK-21 母系细胞,经单细胞克隆技术筛选获得纯度更高的亚系(“C-13” 代表克隆编号)。体外培养时呈典型成纤维样形态,贴壁生长,细胞呈长梭形或星形,排列疏松且边界清晰,较原始 BHK-21 细胞形态更均一。在 37℃、5% CO?的培养条件下,增殖速度快,传代周期约 1-2 天,可适应贴壁培养与悬浮培养,尤其适合无血清培养基驯化,能满足规模化生产需求。

  • 遗传特征:保留 BHK-21 细胞的非整倍体核型(染色体数目约 44-46 条),核型稳定性优于母系细胞,基因组背景清晰且无内源性病毒序列。其成纤维细胞特性显著,分泌胶原蛋白等细胞外基质成分的能力较强,同时对外源基因的转染效率高,可通过抗性筛选快速获得稳定表达株,长期传代后仍能维持生物学特性的一致性。

二、核心应用领域
  1. 病毒培养与疫苗生产

BHK-21 [C-13] 细胞对多种病毒具有ji高的敏感性,是病毒培养与疫苗生产的优选细胞系。它能高效支持 RNA 病毒(如口蹄疫病毒、狂犬病病毒、水疱性口炎病毒)和 DNA 病毒(如痘病毒)的复制,产生高滴度病毒液,且病毒增殖的均一性优于原始 BHK-21 细胞。在疫苗生产中,其优势突出:克隆化特性减少了细胞异质性对病毒产量的影响,可通过悬浮培养实现工业化放大,降低生产成本;细胞培养过程中无外源因子污染,保障疫苗的安全性。目前,口蹄疫疫苗、狂犬病疫苗等多种疫苗的生产均依赖该细胞系,为传染病防控提供了关键保障。
  1. 病毒学基础研究

因遗传背景均一,BHK-21 [C-13] 细胞是解析病毒复制机制、病毒与宿主相互作用的理想模型。其对病毒感染的应答具有高度一致性,可通过检测细胞病变效应(CPE)、病毒滴度及炎症因子分泌,精准分析病毒的致病性。例如,在研究病毒入侵机制时,可利用该细胞系观察病毒与细胞表面受体的结合过程;或通过基因编辑技术改造细胞,探究宿主因子对病毒复制的调控作用,为抗病du药物研发提供实验依据。
  1. 重组蛋白表达与生物制剂开发

该细胞系可作为重组蛋白表达的宿主,尤其适用于生产病毒相关蛋白(如病毒抗原、中和抗体)。其优势在于:转染效率高,可通过瞬时或稳定转染表达目标蛋白;成纤维细胞的分泌特性有助于重组蛋白向细胞外分泌,便于下游纯化。在生物制剂开发中,常被用于制备病毒样颗粒(VLPs)—— 这类颗粒不含病毒核酸,具有免疫原性且无致病性,是新型疫苗研发的重要方向。
三、优势与局限性
  • 优势:遗传均一性高,实验重复性优于原始 BHK-21 细胞;病毒敏感性强,对多种病毒的增殖效率高且稳定;培养适应性好,可在贴壁与悬浮体系中高效增殖,便于规?;?;无内源性病毒污染,生物安全性高,被世界卫生组织(WHO)推荐为疫苗生产的合规细胞系。

  • 局限性:对部分人类病毒(如肝炎病毒)的敏感性较低,应用范围存在一定限制;悬浮培养时易形成细胞聚集体,需通过培养基优化减少聚集;长期传代可能导致病毒敏感性下降,需定期冻存原始克隆株以维持特性。

四、培养与注意事项
  • 培养条件:常规使用含 10% 胎牛血清的 MEM 培养基,添加青mei素 - 链mei素抑制细菌污染。若用于疫苗生产,可改用无血清悬浮培养基,减少外源蛋白干扰,提升产物纯度。培养过程中需控制细胞密度(贴壁培养融合度不超过 80%),避免过度密集导致细胞形态改变或增殖停滞。

  • 污染防控:贴壁细胞易受支原体污染,需定期通过 PCR 或荧光染色检测;冻存时使用含 10% DMSO 的冻存液,液氮保存可长期维持活性,复苏时 37℃水浴快速解冻,离心去除 DMSO 以降低细胞损伤。

五、研究意义
BHK-21 [C-13] 细胞系的建立提升了病毒学研究与疫苗生产的精准性,其克隆化特性解决了原始细胞系异质性带来的实验误差问题。在科研领域,它为病毒复制机制、宿主 - 病毒相互作用等研究提供了标准化模型;在工业领域,其均一性与稳定性保障了疫苗生产的批次一致性,降低了工业化生产的质量波动风险。随着基因编辑技术的应用(如改造细胞表面受体以扩大病毒敏感范围),该细胞系的应用潜力将进一步拓展,持续为传染病防控与生物制药行业提供可靠工具。

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