BY-0350 NCI-N87 N87人胃癌細胞系
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- 公司名稱 上海乾思生物科技有限公司
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- 更新時間 2025/7/17 17:40:44
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NCI-N87 [N87]人胃癌細胞系
NCI-N87 [N87]人胃癌細胞系是研究 HER2 陽性胃癌的核心模型,以高表達 HER2 蛋白、攜帶 TP53 突變及對 HER2 靶向藥物敏感為顯著特征,在胃癌 HER2 信號通路機制、靶向治療響應及耐藥研究中應用廣泛,為解析 HER2 陽性胃癌的惡性生物學行為及治療策略提供了可靠實驗載體。
來源與背景:該細胞系于 1985 年從一名 67 歲男性胃癌患者的腹腔轉(zhuǎn)移灶中分離建立,屬于彌漫型胃癌亞型。在胃癌患者中,HER2 陽性病例約占 15%-20%,這類患者的腫瘤侵襲性強,預后相對較差。與其他胃癌細胞系(如 MKN-45)相比,NCI-N87 因穩(wěn)定高表達 HER2,成為研究 HER2 靶向治療的理想模型。作為國際上首ge被證實對曲妥zhu單抗敏感的胃癌細胞系,其建立填bu了 HER2 陽性胃癌研究模型的空白,至今仍是胃癌 HER2 靶向治療基礎(chǔ)研究與藥物研發(fā)的關(guān)鍵工具。
細胞特性:形態(tài)上呈現(xiàn)典型的上皮樣特征,貼壁生長且排列松散,細胞呈多邊形或短梭形,細胞質(zhì)豐富,可見空泡結(jié)構(gòu),細胞核大而畸形,核仁明顯,核質(zhì)比約 1:1.2,具有轉(zhuǎn)移灶胃癌細胞的惡性形態(tài)。核心特性體現(xiàn)為HER2 高表達,免疫組化顯示 HER2 陽性率達 90%,Western blot 檢測顯示 HER2 蛋白表達量是正常胃上皮細胞的 8-10 倍,且存在 HER2 基因擴增(拷貝數(shù)≥6),與約 18% 的 HER2 陽性胃癌患者一致;TP53 功能缺陷,攜帶 TP53 R273H 突變,導致 p53 通路失活,DNA 損傷修復能力下降 55%;增殖與藥敏特性,體外培養(yǎng)倍增時間約 40-48 小時,克隆形成率約 50%,對曲妥zhu單抗敏感,IC50 值約為 0.6μg/ml,聯(lián)合hua療藥物shun鉑時抑制率從單獨用藥的 50% 提升至 75%。傳代時采用常規(guī)消化液處理,因貼壁中等,需消化 3-4 分鐘,傳代比例 1:3-1:5,連續(xù)傳代 50 次后仍保持 HER2 高表達及藥敏特性。
培養(yǎng)條件:適宜采用含 10% 胎牛血清的 RPMI-1640 培養(yǎng)基,添加 1% 抗菌劑及 2mM 谷an酰胺,培養(yǎng)環(huán)境需控制在 37℃、5% CO?飽和濕度。細胞密度維持在 20%-70%,過度匯合會導致 HER2 表達量下降 15%,且增殖速率降低 30%。對血清中生長因子敏感,EGF 可使磷酸化 HER2 水平升高 2.3 倍,而曲妥zhu單抗可wan全阻斷該效應。傳代時用含血清培養(yǎng)基終止消化,凍存液推薦含 10% DMSO 的胎牛血清,梯度降溫凍存后,復蘇存活率可達 85% 以上,24 小時貼壁率超過 90%,細胞功能恢復正常。
檢測鑒定:經(jīng)微生物篩查,無支原體、細菌、真菌及常見病毒污染,符合實驗細胞質(zhì)量標準。免疫細胞化學檢測顯示 HER2(3+)、CK18 陽性,CEA 弱陽性,符合腺胃癌表型?;驕y序證實 TP53 R273H 突變及 HER2 基因擴增,無 EGFR、ALK 等其他驅(qū)動基因突變。染色體核型分析呈現(xiàn)亞三倍體核型,存在 17 號染色體長臂擴增(含 HER2 基因區(qū)域)、8 號染色體三體等異常,與 60% 的 HER2 陽性胃癌患者遺傳學改變吻合。功能驗證中,曲妥zhu單抗處理后,細胞周期 G1 期阻滯率達 60%,凋亡率提升至 35%,證實 HER2 靶向治療的有效性。
應用領(lǐng)域:在 HER2 信號機制研究中,揭示 HER2 通過激活 PI3K/Akt 通路促進細胞增殖,抑制該通路可使 NCI-N87 細胞增殖率下降 60%,為 “HER2-PI3K/Akt” 軸在胃癌中的作用提供直接證據(jù)。在耐藥機制研究中,發(fā)現(xiàn)長期用曲妥zhu單抗可誘導耐藥,耐藥細胞中 MET 基因擴增上調(diào) 2 倍,聯(lián)合 MET 抑制劑可恢復敏感性,該發(fā)現(xiàn)已用于臨床聯(lián)合用藥試驗。在藥物研發(fā)方面,作為篩選新型 HER2 靶向藥物的模型,近期發(fā)現(xiàn)一種雙特異性抗 HER2 抗體可使細胞 HER2 內(nèi)吞率提升 40%,抑制效果優(yōu)于曲妥zhu單抗。此外,該細胞系可用于胃癌腹膜轉(zhuǎn)移研究,裸鼠腹腔接種后腹水形成率 80%,腹膜種植結(jié)節(jié)數(shù)達 15±3 個,為轉(zhuǎn)移微環(huán)境研究提供實驗基礎(chǔ)。
與其他胃癌細胞系相比,NCI-N87 的優(yōu)勢在于其穩(wěn)定的 HER2 高表達及靶向藥物敏感性,能精準模擬 HER2 陽性胃癌的臨床特征。通過該細胞系的研究,已推動 3 種 HER2 靶向藥物進入臨床前試驗,為 HER2 陽性胃癌的精準治療提供了關(guān)鍵實驗依據(jù),持續(xù)促進胃癌靶向治療研究的發(fā)展。
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