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BY-0609 C3H 10T1/2小鼠胚胎成纖維細(xì)胞系

具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 公司名稱 上海乾思生物科技有限公司
  • 品牌 其他品牌
  • 型號(hào) BY-0609
  • 產(chǎn)地
  • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
  • 更新時(shí)間 2025/7/8 14:49:49
  • 訪問次數(shù) 292

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供貨周期 現(xiàn)貨

C3H 10T1/2小鼠胚胎成纖維細(xì)胞系

C3H 10T1/2小鼠胚胎成纖維細(xì)胞系源自 C3H 小鼠的 14-16 天胚胎間充質(zhì)組織,因化潛能且遺傳背景穩(wěn)定,成為細(xì)胞生物學(xué)、發(fā)育生物學(xué)及腫瘤研究領(lǐng)域的經(jīng)典模型。其du特的可塑性 —— 既能保持成纖維細(xì)胞表型,又可被誘導(dǎo)分化為多種細(xì)胞類型,使其在細(xì)胞命運(yùn)決定機(jī)制研究中具有不可替代的價(jià)值。

顯微鏡下,C3H 10T1/2 細(xì)胞呈典型的成纖維細(xì)胞形態(tài),貼壁生長(zhǎng)態(tài)勢(shì)穩(wěn)定,宛如鋪展在培養(yǎng)皿上的 “梭形纖維網(wǎng)”。細(xì)胞直徑約 12-18 微米,胞體細(xì)長(zhǎng),兩端有明顯的突起,突起長(zhǎng)度可達(dá)胞體直徑的 3-5 倍;胞質(zhì)均勻,內(nèi)有少量細(xì)絲狀結(jié)構(gòu) —— 這是肌動(dòng)蛋白微絲的典型特征,經(jīng)鬼筆環(huán)肽染色后呈綠色網(wǎng)狀分布;細(xì)胞核呈長(zhǎng)橢圓形,位于細(xì)胞中央,核仁清晰可見,染色質(zhì)呈細(xì)顆粒狀,顯示出旺盛的增殖活力。細(xì)胞倍增時(shí)間約 22-28 小時(shí),當(dāng)融合度達(dá)到 60%-70% 時(shí)需傳代,傳代時(shí)用 EDTA 溶液處理后輕柔吹打即可使細(xì)胞脫落,按 1:5-1:8 比例接種,連續(xù)培養(yǎng) 40 代仍能保持穩(wěn)定的分化潛能。
培養(yǎng) C3H 10T1/2 細(xì)胞需模擬胚胎間充質(zhì)微環(huán)境。基礎(chǔ)培養(yǎng)基選用 MEM(α modification),其添加的核苷和氨基酸更符合胚胎細(xì)胞的營(yíng)養(yǎng)需求;添加 10% 胎牛血清提供生長(zhǎng)信號(hào),其中血清中的成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(FGF)對(duì)維持細(xì)胞的未分化狀態(tài)至關(guān)重要。培養(yǎng)環(huán)境需嚴(yán)格控制在 37℃、5% CO?的恒溫培養(yǎng)箱中,pH 值穩(wěn)定在 7.2-7.4,通過培養(yǎng)基中的酚紅指示劑可直觀監(jiān)測(cè)酸堿變化。與腫瘤細(xì)胞系不同,該細(xì)胞對(duì)接觸抑制敏感,當(dāng)融合度超過 80% 時(shí)會(huì)自動(dòng)停止增殖,這一特性使其成為研究細(xì)胞周期調(diào)控的理想材料。
C3H 10T1/2 細(xì)胞的多向分化潛能是其最xian著的生物學(xué)特征。在特定誘導(dǎo)條件下,它可分化為脂肪細(xì)胞、骨細(xì)胞和軟骨細(xì)胞,wan美模擬間充質(zhì)干細(xì)胞的分化路徑。當(dāng)用甲基異丁基黃piao呤、地塞mi松和胰島素聯(lián)合處理時(shí),細(xì)胞會(huì)積累脂滴并表達(dá)脂肪細(xì)胞標(biāo)志物(如 PPARγ、脂聯(lián)素),分化率可達(dá) 70% 以上;在 β- 甘油lin酸鈉和抗壞血酸誘導(dǎo)下,細(xì)胞會(huì)分泌礦化基質(zhì)并表達(dá)骨鈣素,形成類似骨組織的結(jié)節(jié);而轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子 -β(TGF-β)處理則可誘導(dǎo)其表達(dá) Ⅱ 型膠原蛋白,呈現(xiàn)軟骨細(xì)胞表型。這種多向分化能力使其成為研究細(xì)胞命運(yùn)決定的 “活細(xì)胞工具”,例如通過比較不同分化路徑的基因表達(dá)譜,發(fā)現(xiàn) Wnt 信號(hào)通路在骨 - 脂分化平衡中起關(guān)鍵調(diào)控作用 —— 激活 Wnt 信號(hào)可促進(jìn)成骨分化,同時(shí)抑制脂肪形成。
在細(xì)胞轉(zhuǎn)化研究中,C3H 10T1/2 細(xì)胞系因?qū)χ掳┮蛩馗叨让舾卸粡V泛應(yīng)用。它是首ge被證實(shí)可通過紫外線、化學(xué)致癌物(如甲基膽蒽)誘導(dǎo)發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化的細(xì)胞系,轉(zhuǎn)化后的細(xì)胞失去接觸抑制特性,可在軟瓊脂中形成克隆,接種裸鼠后能形成腫瘤。實(shí)驗(yàn)顯示,甲基膽蒽處理可使細(xì)胞的 H-ras 基因突變率增加 10 倍以上,細(xì)胞形態(tài)從梭形變?yōu)槎嘟切危w移能力增強(qiáng) 2-3 倍,這一模型為解析化學(xué)致癌的分子機(jī)制提供了直接證據(jù)。此外,該細(xì)胞系可用于輻射致癌研究,經(jīng) γ 射線照射后,細(xì)胞染色體畸變率隨劑量增加而升高,p53 蛋白表達(dá)量上調(diào) 3 倍,為評(píng)估輻射的遺傳毒性提供了量化標(biāo)準(zhǔn)。
在發(fā)育生物學(xué)研究中,C3H 10T1/2 細(xì)胞系可模擬胚胎發(fā)育過程中的間充質(zhì) - 上皮轉(zhuǎn)化(MET)和上皮 - 間充質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)。在 TGF-β1 誘導(dǎo)下,細(xì)胞會(huì)發(fā)生 EMT:波形蛋白表達(dá)量上調(diào) 4 倍,E - 鈣粘蛋白表達(dá)量下降 60%,細(xì)胞從多邊形轉(zhuǎn)變?yōu)榧忓N形,遷移能力顯著增強(qiáng),wan美模擬了胚胎發(fā)育中原始間充質(zhì)細(xì)胞的遷移過程。而在肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(HGF)處理下,細(xì)胞則發(fā)生 MET,重新表達(dá)上皮標(biāo)志物,形成類似上皮細(xì)胞的聚集體,這一特性為研究胚胎組織器官形成中的細(xì)胞形態(tài)重塑機(jī)制提供了理想模型。
在組織工程領(lǐng)域,C3H 10T1/2 細(xì)胞系是構(gòu)建人工組織的理想種子細(xì)胞。其良好的增殖能力和分化潛能使其可與生物材料(如聚乳酸 - 羥基乙酸共聚物支架)復(fù)合,在體外構(gòu)建骨組織工程移植物。實(shí)驗(yàn)顯示,復(fù)合細(xì)胞的支架植入小鼠骨缺損模型后,4 周內(nèi)即可形成新骨組織,骨密度達(dá)正常骨組織的 60% 以上,為骨缺損修復(fù)研究提供了可行方案。同時(shí),該細(xì)胞分泌的細(xì)胞外基質(zhì)成分(如膠原蛋白、纖連蛋白)可促進(jìn)其他細(xì)胞的粘附與生長(zhǎng),使其成為組織工程支架功能優(yōu)化的 “天然修飾劑”。
培養(yǎng)過程中,C3H 10T1/2 細(xì)胞對(duì)血清質(zhì)量較為敏感,劣質(zhì)血清會(huì)導(dǎo)致其分化潛能下降。建議選用批次穩(wěn)定的胎牛血清,且血清濃度需嚴(yán)格控制在 10%—— 濃度過高會(huì)促進(jìn)細(xì)胞衰老,過低則會(huì)影響增殖活性。細(xì)胞凍存時(shí)使用含 10% DMSO 的血清凍存液,梯度降溫至 - 80℃后轉(zhuǎn)入液氮保存,復(fù)蘇存活率可達(dá) 85% 以上,確保細(xì)胞系的長(zhǎng)期穩(wěn)定供應(yīng)。
前沿研究中,該細(xì)胞系的應(yīng)用持續(xù)拓展。在單細(xì)胞測(cè)序技術(shù)輔助下,通過解析其分化過程中的細(xì)胞異質(zhì)性,發(fā)現(xiàn)了具有干細(xì)胞特性的亞群(約占總細(xì)胞的 5%),為理解細(xì)胞分化的起始機(jī)制提供了新視角;在基因編輯領(lǐng)域,利用 CRISPR 技術(shù)敲除特定分化相關(guān)基因(如 Runx2),可構(gòu)建分化缺陷模型,深入探究該基因在成骨分化中的非冗余功能;在類器官構(gòu)建中,將其與胚胎干細(xì)胞共培養(yǎng),可形成具有三維結(jié)構(gòu)的 “類胚胎體”,模擬早期胚胎發(fā)育中的細(xì)胞間相互作用。

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