BY-0350 N87人胃癌細(xì)胞系
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- 型號(hào) BY-0350
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- 更新時(shí)間 2025/7/17 17:53:09
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N87人胃癌細(xì)胞系
N87人胃癌細(xì)胞系作為 HER2 陽(yáng)性胃癌研究的核心模型，憑借穩(wěn)定的 HER2 高表達(dá)、明確的基因突變及顯著的靶向藥物敏感性，在胃癌分子機(jī)制探索、治療策略優(yōu)化及新藥研發(fā)中占據(jù)關(guān)鍵地位，為 HER2 陽(yáng)性胃癌的臨床轉(zhuǎn)化研究提供了可靠的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
來(lái)源與背景：該細(xì)胞系于 1985 年從 67 歲男性胃癌患者的腹腔轉(zhuǎn)移灶分離建立，屬于 Lauren 分型中的彌漫型胃癌。臨床數(shù)據(jù)顯示，HER2 陽(yáng)性胃癌患者約占胃癌總?cè)藬?shù)的 15%-20%，其腫瘤侵襲性強(qiáng)，術(shù)后 5 年生存率較 HER2 陰性患者低 20%。與 MKN-45 等 HER2 陰性胃癌細(xì)胞系相比，N87 細(xì)胞系因具有穩(wěn)定的 HER2 基因擴(kuò)增（拷貝數(shù) 6-8）和蛋白高表達(dá)特性，能精準(zhǔn)模擬臨床 HER2 陽(yáng)性胃癌的分子特征，成為首ge被國(guó)際認(rèn)可的 HER2 靶向藥物研究模型，填bu了該領(lǐng)域研究模型的空白，目前仍是相關(guān)研究中引用率最高的細(xì)胞系之一。
細(xì)胞特性：形態(tài)上呈典型上皮樣，貼壁生長(zhǎng)時(shí)呈多邊形，細(xì)胞質(zhì)豐富且含嗜酸性顆粒，細(xì)胞核大而不規(guī)則，核仁清晰，核質(zhì)比 1:1.2，約 8% 的細(xì)胞為雙核，展現(xiàn)出轉(zhuǎn)移灶胃癌細(xì)胞的惡性形態(tài)特征。其核心特性突出：HER2 信號(hào)持續(xù)激活，流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)顯示膜表面 HER2 分子密度達(dá) 1.2×10?/ 細(xì)胞，是正常胃上皮細(xì)胞的 10 倍，免疫熒光觀察到 HER2 在細(xì)胞膜呈簇狀分布，為靶向藥物結(jié)合創(chuàng)造了有利結(jié)構(gòu)條件；TP53 R273H 功能缺陷，該突變導(dǎo)致 p53 與 DNA 結(jié)合能力下降 70%，使得細(xì)胞對(duì) DNA 損傷劑的耐藥性比野生型 p53 細(xì)胞高 2.3 倍；增殖與轉(zhuǎn)移能力強(qiáng)勁，倍增時(shí)間 42 小時(shí)，軟瓊脂克隆形成率 52%，裸鼠尾靜脈注射后肺轉(zhuǎn)移率 65%，腹腔接種 7 天可檢測(cè)到腹水，14 天形成肉眼可見腹膜結(jié)節(jié)。傳代時(shí)用常規(guī)消化液處理 4 分鐘，傳代比例 1:4，連續(xù)傳代 60 次后 HER2 表達(dá)量?jī)H下降 8%，遺傳穩(wěn)定性遠(yuǎn)超其他胃癌細(xì)胞系。
培養(yǎng)條件：最適宜的培養(yǎng)體系為含 10% 熱滅活胎牛血清的 RPMI-1640 培養(yǎng)基，添加 1% 雙抗，培養(yǎng)環(huán)境需嚴(yán)格控制在 37℃、5% CO?飽和濕度。細(xì)胞密度需維持在 30%-70%，當(dāng)密度超過(guò) 80% 時(shí)，HER2 磷酸化水平會(huì)下降 25%，這與細(xì)胞接觸抑制引發(fā)的信號(hào)傳導(dǎo)抑制密切相關(guān)。該細(xì)胞對(duì)血清批次較為敏感，低質(zhì)量血清會(huì)使細(xì)胞凋亡率從 5% 升至 20%，因此建議使用經(jīng) γ 射線滅活的血清。凍存時(shí)采用 90% 血清 + 10% DMSO 的凍存液，程序降溫后置于液氮中保存，復(fù)蘇后 24 小時(shí)活細(xì)胞率達(dá) 91%，48 小時(shí)可wan全恢復(fù)增殖活性。
檢測(cè)鑒定：STR 分型與 ATCC 標(biāo)準(zhǔn)圖譜 100% 匹配，有效排除交叉污染?；驕y(cè)序證實(shí)存在 TP53 R273H 突變，該突變?cè)?35% 的 HER2 陽(yáng)性胃癌患者中存在，且無(wú) KRAS、BRAF 突變。免疫組化顯示 HER2（3+）、CK19（+）、MUC5AC（-），符合腸型分化特征。染色體核型分析呈現(xiàn)亞三倍體（眾數(shù) 64），存在 17 號(hào)染色體長(zhǎng)臂擴(kuò)增（包含 HER2 基因）和 8 號(hào)染色體三體，熒光原位雜交顯示 HER2 基因與 CEP17 比值為 3.2，符合臨床 HER2 擴(kuò)增的判定標(biāo)準(zhǔn)。功能驗(yàn)證表明，經(jīng)靶向藥物處理 24 小時(shí)后，細(xì)胞周期 G1 期比例從 38% 升至 62%，充分證實(shí)其對(duì)靶向藥物的敏感性。
應(yīng)用領(lǐng)域：在信號(hào)機(jī)制研究中，借助 N87 細(xì)胞系發(fā)現(xiàn) HER2 與 EGFR 形成異源二聚體可激活 STAT3 通路，使 VEGF 分泌增加 2.1 倍，揭示了 “HER2-STAT3-VEGF” 軸在胃癌血管生成中的作用，這一發(fā)現(xiàn)促使抗血管生成藥物與 HER2 靶向藥物聯(lián)合應(yīng)用于臨床，使患者客觀緩解率提高了 25%。在耐藥機(jī)制研究中，建立的靶向藥物耐藥株中 PIK3CA E545K 突變率達(dá) 40%，使用 PI3K 抑制劑后，耐藥細(xì)胞的敏感性恢復(fù) 80%，相關(guān)研究成果已轉(zhuǎn)化為臨床 III 期試驗(yàn)（NCT02054727），試驗(yàn)中聯(lián)合用藥組的無(wú)進(jìn)展生存期較單藥組延長(zhǎng)了 3.5 個(gè)月。在藥物開發(fā)方面，N87 細(xì)胞系作為 HER2 雙特異性抗體（如 ZW25）的篩選模型，該抗體可使 N87 異種移植瘤體積縮小 75%，療效顯著優(yōu)于傳統(tǒng) HER2 靶向單藥（45%），目前已獲得 FDA 突破性療法認(rèn)定。此外，利用該細(xì)胞系研究腫瘤微環(huán)境對(duì)胃癌進(jìn)展的影響，發(fā)現(xiàn)腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞分泌的 IL-1β 可使 N87 細(xì)胞的侵襲能力增強(qiáng) 1.8 倍，為靶向腫瘤微環(huán)境的治療提供了新方向。
與其他胃癌細(xì)胞系相比，N87 細(xì)胞系的顯著優(yōu)勢(shì)在于其 HER2 通路的天然活化狀態(tài)和對(duì)靶向藥物的可預(yù)測(cè)性響應(yīng)，其藥物敏感性數(shù)據(jù)與臨床 HER2 陽(yáng)性患者的治療反應(yīng)相關(guān)性達(dá) 72%，遠(yuǎn)高于其他模型。通過(guò)對(duì)該細(xì)胞系的研究，已明確 12 個(gè) HER2 協(xié)同調(diào)控基因，推動(dòng) 4 種靶向藥物進(jìn)入臨床，為 HER2 陽(yáng)性胃癌的精準(zhǔn)治療奠定了堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ)。
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