BY-0740 BALB/C 3T3小鼠胚胎成纖維細(xì)胞系
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- 公司名稱 上海乾思生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號 BY-0740
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- 更新時間 2025/7/10 11:33:17
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BALB/C 3T3小鼠胚胎成纖維細(xì)胞系
BALB/C 3T3小鼠胚胎成纖維細(xì)胞系源自 BALB/C 小鼠 14-16 天胚胎組織，因嚴(yán)格遵循 “3T3 培養(yǎng)規(guī)范”（每 3 天傳代，接種密度 3×10?細(xì)胞 / 瓶）而得名，是細(xì)胞轉(zhuǎn)化、致癌作用及病毒學(xué)研究的經(jīng)典模型，在生命科學(xué)領(lǐng)域應(yīng)用廣泛。
該細(xì)胞系具有典型的成纖維細(xì)胞形態(tài)與表型特征。顯微鏡下，細(xì)胞呈長梭形或紡錘形，貼壁生長時排列成平行束狀或漩渦狀，胞質(zhì)豐富，含細(xì)顆粒狀物質(zhì)，細(xì)胞核呈橢圓形，核仁清晰可見。免疫表型分析顯示，細(xì)胞高表達(dá)波形蛋白（Vimentin）和纖維連接蛋白（Fibronectin），不表達(dá)上皮細(xì)胞標(biāo)志物細(xì)胞角蛋白，明確其間質(zhì)細(xì)胞屬性。與其他成纖維細(xì)胞系相比，其形態(tài)均一性更高，傳代過程中極少出現(xiàn)形態(tài)變異，第 10-20 代細(xì)胞仍能保持穩(wěn)定的成纖維細(xì)胞表型，為實驗的可重復(fù)性提供保障。
體外培養(yǎng)中，BALB/C 3T3 細(xì)胞展現(xiàn)出嚴(yán)格的生長調(diào)控特性。最適培養(yǎng)條件為含 10% 胎牛血清的 DMEM 培養(yǎng)基，在 37℃、5% CO?環(huán)境下，傳代周期約 48 小時，細(xì)胞密度達(dá)到 1×10?個 /cm2 時因接觸抑制停止增殖，這一特性使其成為研究細(xì)胞周期調(diào)控的理想模型。其對血清濃度變化極為敏感，血清濃度降至 2% 時，90% 以上細(xì)胞進(jìn)入 G0 期，恢復(fù)血清供應(yīng)后 6 小時內(nèi)同步進(jìn)入 S 期，這種高度同步化的生長特性便于分析細(xì)胞周期特定階段的分子事件。此外，該細(xì)胞系凍存復(fù)蘇性能優(yōu)異，液氮凍存后復(fù)蘇存活率超過 90%，連續(xù)傳代 30 次后仍保持穩(wěn)定的生長特性與表型，是長期實驗研究的可靠工具。
BALB/C 3T3 細(xì)胞的核心價值體現(xiàn)在其極低的自發(fā)轉(zhuǎn)化率與對轉(zhuǎn)化因子的高度敏感性。正常培養(yǎng)條件下，其自發(fā)轉(zhuǎn)化率＜0.01%，而經(jīng)物理（如紫外線）、化學(xué)（如苯并芘）或病毒（如 SV40 病毒）等致癌因素處理后，轉(zhuǎn)化頻率顯著升高，且轉(zhuǎn)化表型穩(wěn)定。轉(zhuǎn)化細(xì)胞表現(xiàn)為接觸抑制消失、多層生長、錨定非依賴性生長（軟瓊脂集落形成率＞20%）及裸鼠致瘤性，這些特征使其成為國際通用的致癌物篩選模型，通過轉(zhuǎn)化灶形成實驗可定量評估受試物的致癌潛力。
在細(xì)胞轉(zhuǎn)化機(jī)制研究中，BALB/C 3T3 細(xì)胞為解析癌變分子通路提供了關(guān)鍵線索。研究發(fā)現(xiàn)，化學(xué)致癌物處理后，細(xì)胞中 Ras 基因第 12 位密碼子發(fā)生突變，導(dǎo)致 Ras 蛋白持續(xù)激活，通過下游 PI3K/Akt 和 MAPK/ERK 通路促進(jìn)細(xì)胞異常增殖。同時，轉(zhuǎn)化細(xì)胞中 p53 抑癌基因表達(dá)下調(diào)，其下游靶基因 p21 的表達(dá)也隨之降低，使細(xì)胞周期檢查點失控，這一分子事件與人類腫瘤的癌變過程高度吻合，為闡明癌變的多階段機(jī)制提供了直接證據(jù)。
病毒學(xué)研究中，BALB/C 3T3 細(xì)胞是多種病毒的敏感宿主。其對鼠肉瘤病毒（MSV）、多瘤病毒等具有高度易感性，感染后可出現(xiàn)明顯的細(xì)胞病變效應(yīng)（CPE），如細(xì)胞變圓、聚集成簇及脫落，同時支持病毒的高效復(fù)制，病毒滴度可達(dá) 10? PFU/mL 以上。這種敏感性源于細(xì)胞表面豐富的病毒受體，如多瘤病毒可通過結(jié)合細(xì)胞表面的唾液酸受體進(jìn)入細(xì)胞，該模型被廣泛用于病毒復(fù)制機(jī)制研究與抗病du藥物篩選。
在細(xì)胞生物學(xué)基礎(chǔ)研究中，該細(xì)胞系常用于探究細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）的合成與重塑。細(xì)胞可分泌 Ⅰ 型、Ⅲ 型膠原蛋白及基質(zhì)金屬蛋白酶（MMPs），在 TGF-β 刺激下，膠原蛋白合成量增加 2 倍以上，同時 MMP-2 活性增強(qiáng)，這種 ECM 合成與降解的動態(tài)平衡對維持細(xì)胞形態(tài)與遷移能力至關(guān)重要。此外，其可用于研究細(xì)胞遷移機(jī)制，在劃痕愈合實驗中，細(xì)胞以 “集體遷移” 方式推進(jìn)，遷移速率受血小板衍生生長因子（PDGF）調(diào)控，PDGF-BB 處理可使遷移距離增加 50%，證實其在細(xì)胞遷移中的調(diào)控作用。
在藥物研發(fā)領(lǐng)域，BALB/C 3T3 細(xì)胞是評估藥物細(xì)胞毒性與致突變性的標(biāo)準(zhǔn)工具。通過中性紅攝取實驗可測定藥物的半數(shù)抑制濃度（IC50），而彗星實驗則可檢測藥物引起的 DNA 損傷，這些數(shù)據(jù)為藥物的安全性評價提供重要參考。同時，其轉(zhuǎn)化模型可用于篩選抗腫瘤藥物，如姜黃素可抑制致癌劑誘導(dǎo)的轉(zhuǎn)化灶形成，使轉(zhuǎn)化頻率下降 70%，其作用機(jī)制與下調(diào) Ras 蛋白表達(dá)相關(guān)，為開發(fā)新型化學(xué)預(yù)防藥物提供了實驗依據(jù)。
隨著基因編輯技術(shù)的發(fā)展，CRISPR/Cas9 修飾的 BALB/C 3T3 細(xì)胞系可精準(zhǔn)模擬特定基因的功能缺失，如敲除 p53 基因后，細(xì)胞自發(fā)轉(zhuǎn)化率升高 10 倍，證實該基因在維持基因組穩(wěn)定性中的關(guān)鍵作用。這種基因工程化細(xì)胞系進(jìn)一步拓展了其在功能基因組學(xué)與疾病模型研究中的應(yīng)用范圍，使其持續(xù)作為生命科學(xué)研究的重要工具。
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