E-EL-H6125 人干擾素α(IFNα)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
| 參考價 | ￥ 2600 |
| 訂貨量 | ≥1盒 |
- 公司名稱 武漢伊萊瑞特生物科技股份有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號 E-EL-H6125
- 產(chǎn)地 湖北武漢
- 廠商性質 生產(chǎn)廠家
- 更新時間 2022/5/27 10:26:12
- 訪問次數(shù) 377
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 96T |
|---|---|---|---|
| 貨號 | E-EL-H6125 | 應用領域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
| 主要用途 | 科研 |
用途
該試劑盒用于體外定量檢測Human 血清，血漿或其他生物體液中天然及部分重組IFNα濃度
檢測原理
本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法。用抗人IFNα抗體包被于酶標板上，實驗時樣品或標準品中的人IFNα會與包被抗體結合，游離的成分被洗去。依次加入生物素化的抗人IFNα抗體和辣根過氧化物酶標記的親和素?？谷薎FNα抗體與結合在包被抗體上的人IFNα結合、生物素與親和素特異性結合而形成免疫復合物，游離的成分被洗去。加入顯色底物(TMB)，TMB在辣根過氧化物酶的催化下呈現(xiàn)藍色，加終止液后變成黃色。用酶標儀在450nm波長處測OD值，IFNα濃度與OD450值之間呈正比，通過繪制標準曲線計算出樣品中IFNα的濃度。
| 反應類型 | 夾心法 |
| 規(guī)格 | 96T |
| 反應時間 | 3.5h |
| 反應性 | Human |
| 檢測方法 | Colormetric |
| 檢測范圍 | 7.81—500 pg/mL |
| 靈敏度 | 4.69 pg/mL |
| 樣本體積 | 100μL |
| 樣本類型 | 血清，血漿或其他生物體液 |
特異性
可檢測樣本中的人IFNα，且與其它相關蛋白無明顯交叉反應。
重復性
板內，板間變異系數(shù)均<10%。
典型數(shù)據(jù)
由于實驗操作條件的不同（如操作者、移液技術、洗板技術和穩(wěn)定條件等），標準曲線的OD值會有所差異。以下數(shù)據(jù)和曲線僅供參考，實驗者需根據(jù)自己的實驗建立標準曲線。
| (pg/mL) | O.D | Average | Corrected |
|---|---|---|---|
| 500 | 2.371 2.387 | 2.379 | 2.288 |
| 250 | 1.827 1.871 | 1.849 | 1.758 |
| 125 | 1.019 0.999 | 1.009 | 0.918 |
| 62.5 | 0.535 0.555 | 0.545 | 0.454 |
| 31.25 | 0.289 0.285 | 0.287 | 0.196 |
| 15.63 | 0.219 0.213 | 0.216 | 0.125 |
| 7.81 | 0.138 0.154 | 0.146 | 0.055 |
| 0 | 0.089 0.093 | 0.091 | -- |
 |
精密度
板內精密度:低濃度樣本,中濃度樣本和高濃度樣本分別在1塊板子上檢測20次。
板間精密度:低濃度樣本,中濃度樣本和高濃度樣本分別在3塊板子上檢測20次。
| Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
| Mean (pg/mL) | 23.29 | 65.91 | 237.77 | 21.20 | 60.10 | 221.45 |
| Standard deviation | 1.49 | 3.41 | 10.94 | 1.19 | 3.05 | 11.03 |
| C V (%) | 6.39 | 5.17 | 4.60 | 5.60 | 5.07 | 4.98 |
回收率
分別往5個不同樣本中添加已知濃度的目標蛋白，做回收實驗，得出回收率范圍和平均回收率。
| Sample Type | Range (%) | Average Recovery (%) |
|---|---|---|
| Serum (n=8) | 91-103 | 97 |
| EDTA plasma (n=8) | 87-98 | 92 |
| Cell culture media (n=8) | 91-105 | 98 |
線性
分別往5個樣本中添加已知濃度的目標蛋白，做回收實驗，得出回收率范圍及平均回收率。將5個樣本分別稀釋2倍，4倍，8倍，16倍做回收實驗，得出回收率范圍及平均回收率。
| Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
|---|---|---|---|---|
| 1:2 | Range (%) | 89-103 | 97-112 | 92-109 |
| Average (%) | 94 | 104 | 99 | |
| 1:4 | Range (%) | 88-101 | 99-113 | 93-109 |
| Average (%) | 95 | 107 | 100 | |
| 1:8 | Range (%) | 87-98 | 93-106 | 92-107 |
| Average (%) | 92 | 99 | 100 | |
| 1:16 | Range (%) | 84-95 | 96-108 | 90-106 |
| Average (%) | 90 | 102 | 97 |
試劑盒組成及保存
未拆封的試劑盒可在2-8℃保存一周；如果一周以后才使用試劑盒，請拆開試劑盒按照下表中的條件分別保存各組分。
| 中文名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 | 保存條件 |
|---|---|---|---|
| ELISA酶標板(可拆卸) | Micro ELISA Plate(Dismountable) | 8 孔×12 條 | -20℃，可存放6個月 |
| 凍干標準品 | Reference Standard | 2 支 | |
| 濃縮生物素化抗體(100×) | Concentrated Biotinylated Detection Ab | 1支 120 μL | |
| 濃縮HRP酶結合物(100×) | Concentrated HRP Conjugate | 1支 120 μL | -20℃(避光)，可存放6個月 |
| 標準品&樣品稀釋液 | Reference Standard & Sample Diluent | 1瓶 20 mL | 2-8℃.可存放6個月 |
| 生物素化抗體稀釋液 | Biotinylated Detection Ab Diluent | 1瓶 14 mL | |
| 酶結合物稀釋液 | HRP Conjugate Diluent | 1瓶 14 mL | |
| 濃縮洗滌液(25×) | Concentrated Wash Buffer (25×) | 1瓶 30 mL | |
| 底物溶液(TMB) | Substrate Reagent | 1瓶 10 mL | 2-8℃(避光) |
| 反應終止液 | Stop Solution | 1瓶 10 mL | 2-8℃ |
| 封板覆膜 | Plate Sealer | 5 張 | |
| 產(chǎn)品說明書 | Product Description | 1 份 | |
| 質檢報告 | Certificate of Analysis | 1 份 |
說明：所有試劑瓶蓋須旋緊以防止蒸發(fā)和微生物的污染。
試劑體積以實際發(fā)貨版說明書為準。相關試劑在分裝時會比標簽上標明的體積稍多一些，請在使用時量取而非直接倒出。
試驗所需自備物品
1. 酶標儀(450nm波長濾光片)
2. 高精度移液器，EP管及一次性吸頭：0.5-10 μL, 2-20 μL, 20-200 μL, 200-1000 μL
3. 37℃恒溫箱，雙蒸水或去離子水
4. 吸水紙
操作步驟
 | 1. 對應板孔中加入100μL標準品工作液或樣本，37℃孵育90分鐘 |
 | 2. 棄掉板內液體后，立即加入100μL生物素化抗體工作液，37℃孵育60分鐘 |
 | 3. 棄掉板內液體，洗板3次 |
 | 4. 每孔加入100μL HRP酶結合物工作液，37℃孵育30分鐘，棄掉板內液體，洗板5次 |
 | 5. 每孔加入90μL底物溶液，37℃孵育15分鐘左右 |
 | 6. 每孔加入50μL終止液 |
 | 7. 立即在450nm波長下讀數(shù)，處理數(shù)據(jù) |
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