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色譜柱常見(jiàn)問(wèn)題（一）
2020年06月02日 14:17:09
來(lái)源：化工儀器網(wǎng) 點(diǎn)擊量：6264
色譜柱是色譜的重要配件，了解色譜柱有助于我們更好的使用色譜儀。
【化工儀器網(wǎng) 技術(shù)指導(dǎo)】色譜柱是色譜的重要配件，了解色譜柱有助于我們更好的使用色譜儀。
1、色譜柱的柱子是否可以反沖？什么樣的柱子可以反沖，什么不可以？反沖后是正著用，還是反著用？
一般的正相反相柱應(yīng)該都能反沖，只有兩端篩板孔徑不對(duì)稱的柱子不能反沖，不過(guò)目前這樣的柱子已經(jīng)比較少見(jiàn)。反沖是為了把柱頭的污染物沖洗掉，反沖后還是正著用比較好，以免柱子的兩頭都被污染。因此，我們提倡正向使用，反向沖洗。
2、拿到一根新柱的時(shí)候應(yīng)該怎樣進(jìn)行活化及維護(hù)？為什么要這樣做？
新柱活化實(shí)際上是一個(gè)平衡的過(guò)程，除了用流動(dòng)相平衡外，有時(shí)候還必須用所測(cè)樣品對(duì)新柱進(jìn)行平衡，特別是測(cè)定分子量比較高的多肽時(shí)。平衡方式即多進(jìn)幾次樣品，直到峰面積和保留時(shí)間穩(wěn)定，再進(jìn)行正式進(jìn)樣測(cè)定。如果要加快平衡時(shí)間，把前面用來(lái)平衡的進(jìn)樣樣品濃度加大，或者不等洗脫完成，連續(xù)進(jìn)樣多針。
用待測(cè)物對(duì)新柱平衡，目的是將硅膠基質(zhì)填料表面具有非特異性吸附的位點(diǎn)的吸附能力飽和。
3、測(cè)定多肽，一般采用什么柱子？
分子量不高的多肽一般選用常規(guī)C18柱就能測(cè)定。也可以用離子交換柱、水性C18柱和Hilic親水作用柱。
4、氨基柱在進(jìn)酸性樣品時(shí)，使用一段時(shí)間后，柱效降低，峰形改變，如何恢復(fù)？
氨基柱測(cè)酸性樣品，應(yīng)該是用氨基柱的HILIC模式。使用后，用5-10倍的柱體積的含0.5-1.0%NH3的乙腈-水(50:50)溶液沖洗該柱，沖洗后當(dāng)然要再用不含堿的流動(dòng)相洗去多余氨。
5、柱子在什么情況下可以清洗篩板呢？
柱頭污染了，就取出污染的，再裝一些填料。
5、如果柱子取下來(lái)放置一段時(shí)間，需要做什么保護(hù)嗎？
對(duì)一般的反相柱，需要在洗干凈后放到純甲醇(乙腈)或者是80%左右的甲醇(乙腈)水中，然后用堵頭塞緊柱兩頭，以免保存溶劑揮發(fā)。不需要做特殊的保護(hù)。
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