二手羅氏 LightCycler® 96 實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀詳盡介紹

一、引言

隨著分子生物技術(shù)的廣泛應(yīng)用，實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（real-time quantitative PCR, 簡稱qPCR）已成為核酸定量分析中常用的一種手段。羅氏公司推出的 LightCycler® 96 實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀是一款中小通量的qPCR系統(tǒng)，專為日?？蒲?、教學(xué)實(shí)驗(yàn)及基礎(chǔ)臨床研究而設(shè)計(jì)。相較新機(jī)，二手 LightCycler® 96 儀器因其成本較低、核心功能完整、維護(hù)便捷，成為眾多實(shí)驗(yàn)室設(shè)備更新或擴(kuò)充中的可選方案之一。

本文將從儀器組成、技術(shù)參數(shù)、應(yīng)用場(chǎng)景、使用注意事項(xiàng)及選購建議等方面，對(duì)二手 LightCycler® 96 儀器進(jìn)行系統(tǒng)性介紹。

二、系統(tǒng)構(gòu)成

LightCycler® 96 實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀整體結(jié)構(gòu)簡潔，易于操作與維護(hù)，主要包括：

1. 主機(jī)本體
   集成熱循環(huán)模塊與熒光檢測(cè)模塊，采用封閉箱體結(jié)構(gòu)，減少環(huán)境干擾。

2. 樣品支持系統(tǒng)
   支持96孔標(biāo)準(zhǔn)qPCR反應(yīng)板，樣本容量靈活，適合常規(guī)樣本量的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)。

3. 多通道熒光檢測(cè)系統(tǒng)
   配備4個(gè)熒光通道，可支持多種熒光染料與探針組合，適應(yīng)不同實(shí)驗(yàn)需求。

4. 控制與分析軟件
   LightCycler® 96 軟件界面友好，功能包括數(shù)據(jù)實(shí)時(shí)采集、Ct值分析、標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制、熔解曲線生成等。

5. 配件與附件
   包括樣品離心板、壓膜器、計(jì)算機(jī)連接線、校準(zhǔn)卡與標(biāo)準(zhǔn)耗材組件等。

三、技術(shù)參數(shù)

四、主要功能與特點(diǎn)

1. 多色熒光檢測(cè)

儀器配備四通道檢測(cè)系統(tǒng)，能夠?qū)崿F(xiàn)最多四種不同靶標(biāo)的同時(shí)檢測(cè)，適用于雙重或多重PCR反應(yīng)方案。在診斷、基因分型或病原體篩查等多目標(biāo)實(shí)驗(yàn)中有廣泛適應(yīng)性。

2. 快速熱循環(huán)控制

得益于其精準(zhǔn)的溫控模塊，LightCycler® 96 能在較短時(shí)間內(nèi)完成一個(gè)完整的PCR循環(huán)，提升實(shí)驗(yàn)效率，尤其適合批量樣本的日常分析需求。

3. 實(shí)時(shí)數(shù)據(jù)分析

軟件可自動(dòng)生成擴(kuò)增曲線、標(biāo)準(zhǔn)曲線、熔解曲線、Ct值表格等數(shù)據(jù)，便于用戶快速獲得結(jié)果并作進(jìn)一步分析。

4. 熔解曲線分析

支持常規(guī)與高分辨率（HRM）熔解曲線分析，用于檢測(cè)基因突變、堿基多態(tài)性等小變異。

5. 操作簡便

該儀器設(shè)計(jì)注重用戶體驗(yàn)，軟件界面清晰，參數(shù)設(shè)置合理，適合科研初學(xué)者及中級(jí)用戶快速上手。

五、典型應(yīng)用場(chǎng)景

1. 醫(yī)學(xué)研究與分子診斷前期分析

• 基因表達(dá)水平定量（如癌癥標(biāo)志物表達(dá)）

• 病毒核酸檢測(cè)（如HBV、HPV、SARS-CoV-2等）

• 微生物載量檢測(cè)與抗藥性基因分析

2. 藥物篩選與藥效驗(yàn)證

• 藥物處理前后基因表達(dá)變化檢測(cè)

• 信號(hào)通路相關(guān)基因的表達(dá)波動(dòng)追蹤

• siRNA/miRNA作用機(jī)制評(píng)價(jià)

3. 動(dòng)植物基因研究與轉(zhuǎn)基因篩選

• 轉(zhuǎn)基因作物的外源基因定量

• 物種溯源及遺傳背景分析

• 植物病害相關(guān)基因表達(dá)水平研究

4. 教學(xué)與基礎(chǔ)培訓(xùn)實(shí)驗(yàn)

• qPCR基礎(chǔ)技能培訓(xùn)

• 實(shí)驗(yàn)原理教學(xué)演示

• 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)與數(shù)據(jù)分析訓(xùn)練

六、二手設(shè)備的價(jià)值與使用建議

優(yōu)勢(shì)：

1. 經(jīng)濟(jì)實(shí)用：適合預(yù)算有限的中小型實(shí)驗(yàn)室或教學(xué)單位。

2. 性能可靠：核心溫控與檢測(cè)模塊耐用，經(jīng)過保養(yǎng)后仍可長期運(yùn)行。

3. 結(jié)構(gòu)緊湊：適合空間有限的實(shí)驗(yàn)環(huán)境布置。

4. 維護(hù)成本低：維修配件易得，常規(guī)維護(hù)操作簡單。

注意事項(xiàng)：

1. 核查使用記錄與保養(yǎng)情況：重點(diǎn)檢查溫控性能是否正常、熒光通道是否存在漏檢或信號(hào)衰減問題。

2. 校準(zhǔn)狀態(tài)與軟件授權(quán)：是否附帶原廠或第三方校準(zhǔn)文件，軟件是否具備完整授權(quán)。

3. 兼容性問題：軟件是否兼容當(dāng)前操作系統(tǒng)，是否有配套硬件控制單元。

4. 配件完整性：原配附件是否齊全，是否包含熱蓋、壓膜器、適配器等核心組件。

七、操作與維護(hù)建議

日常操作注意事項(xiàng)：

• 使用前確保反應(yīng)板密封良好，避免熒光信號(hào)泄漏。

• 實(shí)驗(yàn)前進(jìn)行系統(tǒng)自檢，確保光路與溫控系統(tǒng)穩(wěn)定。

• 建議定期進(jìn)行陰性對(duì)照、重復(fù)孔設(shè)置以檢測(cè)系統(tǒng)誤差。

定期維護(hù)建議：

• 每次使用后清理樣本托盤及熱蓋區(qū)域。

• 每3–6個(gè)月進(jìn)行溫控校準(zhǔn)與光路檢測(cè)，確保信號(hào)采集準(zhǔn)確。

• 如長期不使用，應(yīng)進(jìn)行設(shè)備封存，并防止潮濕環(huán)境侵蝕電路部件。

八、選購二手 LightCycler® 96 的建議

1. 優(yōu)選來源可靠的正規(guī)供應(yīng)商，如科研儀器回收商、二手醫(yī)療設(shè)備平臺(tái)等，避免從來歷不明渠道購入無售后保障的儀器。

2. 建議要求試機(jī)演示，驗(yàn)證加熱模塊、四通道信號(hào)響應(yīng)情況及軟件操作界面是否正常。

3. 若條件允許，可配合第三方檢測(cè)機(jī)構(gòu)進(jìn)行校準(zhǔn)與維護(hù)認(rèn)證，確保儀器狀態(tài)適用于科研與教學(xué)場(chǎng)景。

九、結(jié)語

LightCycler® 96 實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀以其穩(wěn)定的性能、簡便的操作和靈活的軟件支持，在基礎(chǔ)研究、教學(xué)實(shí)驗(yàn)與初級(jí)臨床應(yīng)用中有著廣泛的適用性。對(duì)于預(yù)算有限或?qū)で笮詢r(jià)比解決方案的實(shí)驗(yàn)室而言，選購二手該型號(hào)設(shè)備是一種可行的選擇。

通過規(guī)范的操作流程與合理的使用維護(hù)，即使是二手設(shè)備，也能夠長期保持良好的檢測(cè)狀態(tài)，為科研與應(yīng)用提供可靠數(shù)據(jù)支持。隨著科研設(shè)備的可持續(xù)使用理念推廣，二手 LightCycler® 96 有望繼續(xù)在多個(gè)科研場(chǎng)景中發(fā)揮其作用。