各种His.Bind基质的产品如何选择:本文介绍带Ni NTA琼脂糖、无Ni IDA琼 脂糖、带Ni的IDA琼脂糖预装柱、无Ni IDA触须甲?;⒋鳱i的IDA纤维素预装筒、带Ni的IDA磁性琼脂糖……等His.Bind基质的特点和应用。
His.Bind基质选择指南:与任何纯化介质一样,His.Bind树脂在接近结合载量时使用,可获得zui干净的分离效果
产品 | 类型 | 载量 | 特点 | 应用 |
Ni-NTA His.Bind 树脂 | 带Ni NTA琼脂糖 | 5-10 mg/ml | zui小的Ni2+浸出与20mM b-ME相容 | 小到中量,重力流柱推荐用于真核抽提物 |
Ni-NTA His.Bind Superflow | 带Ni NTA琼脂糖 | 5-10 mg/ml | zui小的Ni2+浸出与20mM b-ME相容高流速和压力 | 小量到生产级FPLC或重力流柱推荐用于真核抽提物 |
His.Bind树脂 | 无Ni IDA琼 脂糖 | 8 mg/ml | 可重复使用多次与His.Bind缓冲试剂盒兼容 | 小到中量重力流柱或批次模式 |
His.Bind柱(Cloumn) | 带Ni的IDA琼脂糖预装柱 | 10 mg/次 | 预装柱与His.Bind Quick缓冲试剂盒兼容 | 方便的纯化重力流柱 |
His .Bind Fractogel(S) | 无Ni IDA触须甲?;?/span> | >10 mg/ml | 20-40mM颗粒大小高流速和压力 | 小量到生产级FPLC或重力流柱高分辨率分离 |
His.Bind Fractogel(M) | 无Ni IDA触须甲酰化 | >10 mg/ml | 40-90mM颗粒大高流速和压力小 | 小量到生产级FPLC或重力流柱 |
His.Bind Quick 300筒( Ca rtridge) | 带Ni的IDA纤维素预装筒 | 0.5 mg/次 | 每端锁紧接口与His.Bind Quick缓冲试剂盒配合使 用 | 注射器操作真空多支管操作快速纯化 |
His.Bind Quick 900 筒(Cartridge) | 带Ni的IDA纤维素预装筒 | 2 mg/次 | 每端锁紧接口 与His.Bind Quick缓冲试剂盒配合使用 | 注射器操作 |
His.Bind Quick 柱(Cloumn) | 带Ni的IDA纤维素预装柱 | 5 mg/次 | 每端锁紧接口与His.Bind Quick缓冲试剂盒配合使用 | 真空多支管操作快速纯化多个样品 |
His.Bind 磁化琼脂糖珠 | 带Ni的IDA磁性琼脂糖 | 5 mg/ml | 3m磁性琼脂糖珠 | 快速小量纯化磁性分离适合高通量操作 |
His.Bind柱
His.Bind柱预装了1.25ml柱床体积的Ni2+结合His.Bind树脂。顶部和底部的玻璃纤维确保上样和走柱时缓冲液均匀流动和zui小干扰。使用BugBuster和Benzonase?核酸酶制备细菌裂解物可获得较好效果。
His.Bind和His.Bind快速缓冲液试剂盒
His.Bind缓冲液试剂盒是一套经过测试和优化的缓冲液,用于IDA His.Bind树脂一步法纯化蛋白。包括的溶液可用于10根2.5ml柱的Ni2+结合、洗涤和洗脱。除了8X Ni2+结合缓冲液(树脂以Ni2+结合形式提供),His.Bind快速缓冲液试剂盒与His.Bind缓冲液试剂盒成分*一样。
Ni-NTA缓冲液试剂盒
Ni-NTA缓冲液试剂盒提供的一套缓冲液优化用于在Ni-NTA His.Bind树脂上纯化His.Tag融合蛋白。这些磷酸缓冲液与His.Bind缓冲液试剂盒中的Tris溶液不同。用户可以参考操作指南,使用4X浓缩液进行结合、洗涤和洗脱操作。
BugBusterTM Ni-NTA His.Bind和His.Bind纯化试剂盒
BugBuster蛋白抽提试剂是从大肠杆菌有效抽提可溶性蛋白的即用型溶液(不需要机械破碎细菌)。BugBuster Ni-NTA His.Bind和His.Bind纯化试剂盒带有BugBuster试剂(方便制备可溶性细胞抽提物)以及His.Tag融合蛋白亲和纯化的相应树脂。两个试剂盒都包括Benzonase核酸酶,用于降低粘度并从蛋白制备物中去除核酸。BugBuster His.Bind纯化试剂盒还包括层析缓冲液。
His.Tag/His.Bind技术可用于纯化His.Tag序列中的组氨酸与固定化金属离子(通常为Ni2+)。zui常用的金属螯合物包括NTA和IDA,在实际应用中,这两种螯合物各有利弊,因此要优化条件,尽量减少非特异结合蛋白的共纯化才能达到*实验结果。
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