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大鼠糖胺聚糖(GAG)ELISA 试剂盒|茁彩生物

来源:上海茁彩生物科技有限公司   2025年08月04日 11:02  

糖胺聚糖(Glycosaminoglycan,GAG)是一类由重复的二糖单位构成的直链多糖,广泛存在于动物体内的细胞外基质和细胞表面。在大鼠体内,GAG 种类丰富,主要包括透明质酸、硫酸软骨素、硫酸皮肤素、硫酸角质素和肝素等。

这些不同类型的 GAG 在化学结构上存在差异,硫酸化程度和二糖单位的组成各有特点,这也决定了它们在大鼠体内具有不同的分布和功能。例如,硫酸软骨素在大鼠的软骨组织中含量较高,而透明质酸则广泛分布于皮肤、关节滑液等组织中。

大鼠体内 GAG 的含量和代谢状态与多种生理和病理过程密切相关。在正常生理状态下,GAG 的合成与降解处于动态平衡,维持着组织器官的正常结构和功能。当大鼠发生关节炎、软骨损伤、肝纤维化、肿瘤等疾病时,GAG 的代谢会出现异常,其在血液、尿液或组织中的含量会发生显著变化,因此成为相关疾病研究和诊断的重要指标。

生理功能

GAG 在大鼠体内具有多种重要的生理功能,涉及组织结构维持、物质代谢调节、细胞信号传递等多个方面。

首先,维持组织和器官的结构完整性。GAG 是细胞外基质的重要组成成分,它们能够与胶原蛋白、弹性蛋白等蛋白质结合,形成具有一定强度和弹性的网络结构,为组织和器官提供机械支撑。例如,在大鼠的软骨组织中,硫酸软骨素与胶原蛋白相互作用,赋予软骨良好的抗压性和弹性,使其能够承受关节活动时的压力。

其次,参与水和电解质的调节。GAG 分子具有大量的负电荷,能够吸引水分子和阳离子,在组织中形成水合凝胶,起到维持组织含水量、调节电解质平衡的作用。这一功能在关节滑液中尤为重要,透明质酸形成的水合凝胶能够润滑关节,减少摩擦。

此外,调节细胞的生长、分化和迁移。GAG 可以与多种生长因子、细胞因子等生物活性分子结合,通过影响这些分子的活性和分布,调控细胞的生长、分化和迁移过程。例如,肝素能够与成纤维细胞生长因子结合,促进细胞的增殖和血管生成,在大鼠的组织修复过程中发挥重要作用。

同时,GAG 还具有抗凝、抗炎等功能。肝素是一种重要的抗凝物质,能够抑制凝血酶的活性,防止血液凝固;某些 GAG 则可以通过抑制炎症因子的释放或作用,减轻炎症反应,保护组织免受损伤。

检测原理

大鼠糖胺聚糖(GAG)ELISA 试剂盒是基于酶联免疫吸附试验(ELISA)原理,专门用于定量检测大鼠样本(如血清、血浆、尿液、组织匀浆、细胞培养液等)中 GAG 含量的专业检测工具。

该试剂盒的检测原理以抗原与抗体的特异性结合为核心,具体检测流程如下:试剂盒中的酶标板预先包被了针对大鼠 GAG 的特异性单克隆抗体。当加入待检测的大鼠样本时,样本中的 GAG 会与酶标板上包被的抗体发生特异性结合,形成抗原 - 抗体复合物,这一过程通常在 37℃下孵育一定时间,以保证结合充分。

孵育结束后,进行洗涤步骤,将未与包被抗体结合的其他杂质清洗去除,避免干扰后续检测。接着,向酶标板中加入酶标记的抗大鼠 GAG 多克隆抗体(常用的标记酶为辣根过氧化物酶),该酶标抗体可与已结合在包被抗体上的 GAG 发生特异性结合,形成 “包被抗体 - GAG - 酶标抗体” 的夹心结构。再次孵育后,进行洗涤以去除未结合的酶标抗体。

随后,加入底物溶液(如 TMB 底物液),酶标抗体上的酶会催化底物发生显色反应,生成有色产物。显色反应的强度与样本中 GAG 的含量呈正相关,即样本中 GAG 含量越高,显色反应越强烈,颜色越深。

最后,加入终止液(如硫酸溶液)终止反应,此时反应液颜色会发生变化(通常由蓝色变为黄色)。使用酶标仪在特定波长(一般为 450nm)下测定各孔的吸光度(OD 值)。根据试剂盒提供的 GAG 标准品制作标准曲线,将待检测样本的 OD 值与标准曲线进行对比,即可计算出样本中 GAG 的具体含量,从而了解大鼠体内 GAG 的代谢状态。


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