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人 S100 钙结合蛋白 A4(S100A4)ELISA 试剂盒|茁彩生物

来源:上海茁彩生物科技有限公司   2025年08月04日 11:01  

人 S100 钙结合蛋白 A4(S100A4)是 S100 蛋白家族的重要成员,因能与钙离子结合而得名。其基因定位于人类特定染色体上,编码的蛋白质由特定数量的氨基酸残基组成,分子结构中含有两个 EF-hand 钙结合结构域,这是其发挥功能的关键结构基础。

S100A4 在人体多种组织和细胞中均有表达,尤其在成纤维细胞、上皮细胞、免疫细胞等中较为常见。在正常生理状态下,S100A4 的表达水平维持在一定范围,参与机体的多种生理过程。而在病理状态下,如肿瘤发生发展、炎症反应、纤维化疾病等,其表达水平会出现显著异常。例如,在多种恶性肿瘤(如乳腺癌、结肠癌、肺癌等)中,S100A4 常常高表达,且与肿瘤的侵袭、转移、预后不良等密切相关,因此成为肿瘤研究和临床诊断中的重要生物标志物。

生理功能

S100A4 在人体中具有多样的生理功能,涉及细胞的多种生命活动调控。

首先,参与细胞迁移和侵袭。S100A4 可以通过与细胞骨架相关蛋白(如肌动蛋白、微管蛋白等)相互作用,调节细胞骨架的重组,从而影响细胞的形态和运动能力。在肿瘤细胞中,高表达的 S100A4 能增强肿瘤细胞的迁移和侵袭能力,促进肿瘤的转移和扩散。

其次,调节细胞增殖和凋亡。S100A4 能够通过激活或抑制特定的信号通路(如 MAPK、NF-κB 等),参与细胞增殖和凋亡的调控。在不同的细胞类型和生理病理状态下,其对细胞增殖和凋亡的影响可能不同,例如在某些肿瘤中,它可促进肿瘤细胞的增殖并抑制其凋亡,从而有利于肿瘤的生长。

此外,参与炎症反应。S100A4 可以作为一种促炎因子,在炎症部位释放后,与免疫细胞表面的受体结合,激活免疫细胞,促进炎症因子(如 IL-6、TNF-α 等)的释放,放大炎症反应。同时,它也可能在炎症的修复过程中发挥一定作用。

同时,S100A4 还与组织纤维化相关。在肝纤维化、肺纤维化等疾病中,S100A4 可促进成纤维细胞的活化和增殖,增加胶原蛋白等细胞外基质的合成,加速纤维化进程。

检测原理

人 S100 钙结合蛋白 A4(S100A4)ELISA 试剂盒是基于酶联免疫吸附试验(ELISA)原理,专门用于定量检测人样本(如血清、血浆、组织匀浆、细胞培养液等)中 S100A4 含量的专业检测工具。

该试剂盒的检测原理以抗原与抗体的特异性结合为核心,具体检测流程如下:试剂盒中的酶标板预先包被了针对人 S100A4 的特异性单克隆抗体。当加入待检测的人样本时,样本中的 S100A4 会与酶标板上包被的抗体发生特异性结合,形成抗原 - 抗体复合物,这一过程通常在 37℃下孵育一定时间,以保证结合充分。

孵育结束后,进行洗涤步骤,将未与包被抗体结合的其他杂质清洗去除,避免干扰后续检测。接着,向酶标板中加入酶标记的抗人 S100A4 多克隆抗体(常用的标记酶为辣根过氧化物酶),该酶标抗体可与已结合在包被抗体上的 S100A4 发生特异性结合,形成 “包被抗体 - S100A4 - 酶标抗体” 的夹心结构。再次孵育后,进行洗涤以去除未结合的酶标抗体。

随后,加入底物溶液(如 TMB 底物液),酶标抗体上的酶会催化底物发生显色反应,生成有色产物。显色反应的强度与样本中 S100A4 的含量呈正相关,即样本中 S100A4 含量越高,显色反应越强烈,颜色越深。

最后,加入终止液(如硫酸溶液)终止反应,此时反应液颜色会发生变化(通常由蓝色变为黄色)。使用酶标仪在特定波长(一般为 450nm)下测定各孔的吸光度(OD 值)。根据试剂盒提供的 S100A4 标准品制作标准曲线,将待检测样本的 OD 值与标准曲线进行对比,即可计算出样本中 S100A4 的具体含量,从而为相关疾病的研究、诊断和治疗监测提供依据。


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