小鼠 CXC 趋化因子配体 14(CXCL14)是 CXC 趋化因子家族的成员之一,又被称为 BRAK(B - 细胞趋化因子)或 MIP-2γ(巨噬细胞炎症蛋白 - 2γ)。其基因定位于小鼠特定的染色体上,编码的蛋白质由特定数量的氨基酸残基组成,分子结构中含有典型的 CXC 趋化因子结构域,即两个半胱氨酸(C)之间隔有一个其他氨基酸(X)。
CXCL14 在小鼠体内的组织分布具有一定的特异性,在肝脏、肾脏、肺脏、肠道以及多种免疫器官(如脾脏、淋巴结)中均有表达,其中在某些正常组织中的基础表达水平相对较高。在生理状态下,CXCL14 的表达处于动态平衡,参与机体的免疫调节和生理过程。而在病理状态下,如炎症反应、肿瘤发生、组织损伤等,其表达水平会发生明显变化。例如,在肿瘤微环境中,CXCL14 的表达可能上调或下调,通过影响免疫细胞的浸润和肿瘤细胞的生物学行为,参与肿瘤的发生发展,因此成为相关研究领域的重要指标。
生理功能
CXCL14 在小鼠体内具有多种重要的生理功能,主要围绕免疫调节、细胞趋化以及组织稳态维持等方面展开。
首先,强大的趋化作用。CXCL14 能够特异性地吸引多种免疫细胞,如单核细胞、巨噬细胞、树突状细胞等向其浓度梯度较高的部位迁移。这种趋化作用在机体的免疫防御中至关重要,当病原体入侵或组织发生损伤时,CXCL14 被释放,招募免疫细胞到达炎症或损伤部位,启动免疫应答,清除病原体并参与组织修复。
其次,参与免疫调节。CXCL14 可以调节免疫细胞的活性和功能,例如促进巨噬细胞的活化和细胞因子的分泌,增强机体的 innate 免疫(固有免疫)应答。同时,它还可能参与 adaptive 免疫(适应性免疫)的调控,影响 T 细胞、B 细胞的增殖、分化和功能,维持免疫系统的平衡。
此外,在组织稳态和修复中发挥作用。CXCL14 可能参与多种组织的正常生理稳态维持,在组织损伤后,其表达水平的变化可能促进成纤维细胞等细胞的迁移和增殖,加速组织的修复和再生过程。例如,在皮肤损伤愈合过程中,CXCL14 可能通过趋化相关细胞,促进伤口的愈合。
同时,CXCL14 与肿瘤的发生发展存在关联。研究发现,在不同类型的肿瘤中,CXCL14 的作用可能具有双重性,既可能通过招募免疫细胞抑制肿瘤生长,也可能通过促进肿瘤血管生成、肿瘤细胞迁移等方式促进肿瘤进展,具体作用机制因肿瘤类型和微环境而异。
检测原理
小鼠 CXC 趋化因子配体 14(CXCL14)ELISA 试剂盒是基于酶联免疫吸附试验(ELISA)原理,专门用于定量检测小鼠样本(如血清、血浆、组织匀浆、细胞培养液、腹腔液等)中 CXCL14 含量的专业检测工具。
该试剂盒的检测原理以抗原与抗体的特异性结合为核心,具体检测流程如下:试剂盒中的酶标板预先包被了针对小鼠 CXCL14 的特异性单克隆抗体。当加入待检测的小鼠样本时,样本中的 CXCL14 会与酶标板上包被的抗体发生特异性结合,形成抗原 - 抗体复合物,这一过程通常在 37℃下孵育一定时间(如 60 分钟),以保证结合充分。
孵育结束后,进行洗涤步骤(通常洗涤 3-5 次),将未与包被抗体结合的其他杂质、干扰物质等清洗去除,避免对后续检测步骤产生干扰。接着,向酶标板中加入酶标记的抗小鼠 CXCL14 多克隆抗体(常用的标记酶为辣根过氧化物酶,HRP),该酶标抗体可与已结合在包被抗体上的 CXCL14 发生特异性结合,形成 “包被抗体 - CXCL14 - 酶标抗体” 的夹心结构,再次在 37℃下孵育一定时间(如 30-60 分钟)后,进行洗涤以去除未结合的酶标抗体。
随后,加入底物溶液(如 TMB 底物液),酶标抗体上的 HRP 会催化底物发生氧化还原反应,生成蓝色的产物。显色反应的强度与样本中 CXCL14 的含量呈正相关,即样本中 CXCL14 含量越高,显色反应越强烈,蓝色越深。
最后,加入终止液(如 2M 硫酸溶液)终止反应,此时反应液的颜色会由蓝色变为黄色。使用酶标仪在特定波长(一般为 450nm,部分试剂盒可能需要参考 630nm 作为校正波长)下测定各孔的吸光度(OD 值)。根据试剂盒提供的 CXCL14 标准品(不同浓度梯度)制作标准曲线,将待检测样本的 OD 值代入标准曲线,即可计算出样本中 CXCL14 的具体浓度。
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