在细胞与基因治疗(CGT)迈向产业化的今天,如何在不依赖病毒载体的前提下,高效递送复杂构建体,成为工艺开发中的关键挑战。Lonza最新发布的4D-Nucleofector® LV PRO???/span>,正是为此而生。
非病毒递送的“放大难题”
正在被解决
传统电转系统在小体积(如20μL或100μL)下表现良好,但一旦放大至临床所需的10亿级T细胞,效率、活性和一致性往往难以维持。LV PRO通过两种全新耗材——2mL固定体积加样盒(FV)与20mL流通式加样盒(FT),实现了从微量到大体积的无缝扩展。
关键数据
在20μg/mL mRNA或12μg/mL质粒DNA条件下,LV PRO在2mL和20mL体积中均实现了与100μL参考组相当的转染效率(GFP+细胞比例)
细胞活性在转染后24小时仍保持>90%

CRISPR编辑:
效率与一致性的双重突破
在多个供体的实验中,LV PRO在CRISPR敲除(TRAC KO)与敲入(RAB11A-GFP KI)中均展现出性能:
敲入效率:在7位供体、13组实验中,LV PRO的敲入效率与100μL参考组一致,且在不同电转程序下均表现稳定
一致性:20mL流通式加样盒在13个连续循环中,敲入效率与回收体积波动极小,表明系统具备高度工艺稳定性
从电转到扩增:
完整的细胞工程流程验证
在G-Rex®生物反应器中,LV PRO转染后的T细胞可实现53–70倍扩增,最终获得超过4亿个活细胞,验证了其在下游培养中的兼容性与可扩展性。
适配多种构建体与起始材料
无论是3.5kb还是1.4kb的HDR模板,LV PRO均可高效递送;同时支持不同来源的T细胞(PBMC、CD3+,激活或静息状态),为工艺开发提供更大灵活性。
总结
LV PRO,不只是“放大”,更是“复制”
Lonza的LV PRO??椴唤鼋饩隽朔遣《镜菟驮诖筇寤碌男势烤?,更通过一致性、灵活性与可扩展性,为CGT制造流程提供了真正可复制的解决方案。
相关产品
免责声明
- 凡本网注明“来源:化工仪器网”的所有作品,均为浙江兴旺宝明通网络有限公司-化工仪器网合法拥有版权或有权使用的作品,未经本网授权不得转载、摘编或利用其它方式使用上述作品。已经本网授权使用作品的,应在授权范围内使用,并注明“来源:化工仪器网”。违反上述声明者,本网将追究其相关法律责任。
- 本网转载并注明自其他来源(非化工仪器网)的作品,目的在于传递更多信息,并不代表本网赞同其观点和对其真实性负责,不承担此类作品侵权行为的直接责任及连带责任。其他媒体、网站或个人从本网转载时,必须保留本网注明的作品第一来源,并自负版权等法律责任。
- 如涉及作品内容、版权等问题,请在作品发表之日起一周内与本网联系,否则视为放弃相关权利。