正确操作二氧化碳摇床(CO? Incubator)需要遵循以下步骤,以确保细胞培养环境的稳定性和实验结果的可靠性:
一、操作前准备
1. 检查设备状态
确认电源、CO?气源连接正常,气压稳定(通常为0.1~0.2 MPa)。
检查水箱水位(如为水套式),确保水位在标记范围内。
清洁内腔:使用75%酒精或无腐蚀性消毒剂擦拭内壁、搁板和传感器,避免污染。
2. 预热与平衡
提前24小时开机预热(尤其水套式),设定温度至37℃(或其他所需温度)。
设置CO?浓度(通常5%),待数值稳定后再放入细胞。
二、日常使用步骤
1. 放入培养物
开门时间尽量短(<30秒),避免温湿度及CO?浓度波动。
培养瓶/皿摆放需留空隙,保证气流循环均匀。
2. 参数设置与监控
温度:37℃(哺乳动物细胞常用),误差范围±0.1℃。
CO?浓度:5%(根据培养基需求调整),通过红外或热导传感器校准。
湿度:维持≥95% RH(通过托盘注灭菌水或自动加湿系统)。
3. 防污染措施
定期更换灭菌水(每周1次),避免微生物滋生。
使用含铜内胆或紫外灭菌功能(如有)降低污染风险。
三、维护与注意事项
1. 定期校准
每年至少1次专业校准(温度、CO?浓度、湿度)。
日??捎枚懒⒋衅鳎ㄈ缡殖质紺O?检测仪)交叉验证。
2. 清洁与消毒
每月*底清洁:断电后拆卸搁板、支架,高温高压灭菌或酒精浸泡。
避免使用腐蚀性清洁剂(如次氯酸钠),以防损坏传感器。
3. 故障处理
CO?浓度不稳定:检查气瓶压力、管路漏气或传感器故障。
温度异常:水套式检查水位,气套式确认加热系统是否正常。
长期停用时排空水箱,断电并关闭气源。
四、安全提示
CO?泄漏风险:确保通风良好,安装CO?报警器(浓度>5000 ppm有窒息危险)。
生物安全:操作时戴手套,培养物泄漏需立即消毒处理。
附:快速操作流程图
开机预热 → 设置参数 → 稳定后放入细胞 → 监控记录 → 定期维护
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