微生物分类以及冻干要点
微生物菌种的分类是一个复杂且多层次的体系,涉及形态、生理、遗传和生态等多个方面。一般可分为原核生物(细菌、古菌)、真菌和病毒。
它的鉴定方法有:(1)传统技术:API试剂条(生化反应)、显色培养基快速鉴定。(2)分子技术:PCR扩增(如16S rRNA测序)、MALDI-TOF质谱(快速蛋白指纹分析)。(3)宏基因组学:直接从环境样本中获取基因组信息,鉴定未培养微生物。
微生物冻干(冷冻干燥)是长期保存菌种活性的重要方法,冷冻干燥保存适用于大多数细菌、放线菌、病毒、噬菌体、立克次体、霉菌和酵母等的保藏等。
冻干流程
1、预冻
温度:快速降温至 -40℃以下(避免大冰晶刺破细胞)。
2、初级干燥(升华干燥)
真空度:维持 10~30 Pa,促进冰晶直接升华。
温度:缓慢升温至 -20℃~0℃(根据?;ぜ梁途帜褪苄缘髡?。
时间:通常 12~24小时(视样品体积和含水量而定)。
3、次级干燥(解析干燥)
温度:逐步升至 20℃~30℃,去除结合水。
真空度:保持<5 Pa,时间约 4~6小时。
4、封存
真空或充惰性气体:充氮气或氩气后密封,避免吸潮。
储存条件:-20℃或4℃避光保存,部分菌种可常温保存。
冻干技术的核心是平衡脱水效率与细胞?;ぃ韪菸⑸锾匦远ㄖ品桨?。通过优化参数和严格质控,可实现菌种活性数十年稳定保存。
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