在使用移液工作站时,为确保实验的准确性、重复性及设备安全,需注意以下关键事项:
1. 设备准备与校准
定期校准:按厂家建议或实验室标准(如ISO 8655)校准移液头,确保精度(如±1%)和重复性(如CV≤1%)。
环境控制:在温度(20 25℃)、湿度(45 65%)稳定的环境中操作,避免气流干扰(如关闭通风设备)。
耗材匹配:使用与工作站兼容的吸头,避免漏液或密封不良(如通过压力测试验证)。
2. 操作规范
液体性质:
高黏度液体(如甘油)需设置延迟吸液/排液时间。
挥发性液体(如乙醇)建议使用低吸附吸头,缩短操作时间。
吸液深度:浸入深度为吸头长度的2 3倍(如1mL吸头浸入3 5mm),避免过深导致外壁挂液。
排液角度:贴壁排液时保持10 45°倾斜,确保液体排出。
分液模式:反向吸液(Reverse Pipetting)适用于易产生气泡的液体(如蛋白溶液)。
3. 污染控制
生物安全:处理生物样本时启用HEPA过滤系统,操作后用70%乙醇或10%次氯酸钠消毒台面。
交叉污染:
更换样品时使用带滤芯吸头。
执行“液面跟随”功能,避免吸头触碰管壁残留。
清洁程序:每周用无绒布清洁传感器轨道,每月润滑机械臂关节(使用硅基润滑剂)。
4. 程序设置优化
预润洗:对蛋白类样品执行2 3次预润洗,减少吸附损失。
速度调节:
吸取高黏度液体时,降低速度至50%(如默认500μL/s降至250μL/s)。
分装易起泡液体时关闭“混合”功能。
体积限制:避免使用吸头标定容积的10%以下(如1000μL吸头最小分装100μL)。
5. 维护与故障处理
日常检查:
确认废液瓶容量(如4L废液瓶剩余≤3L时清空)。
检查TipCon传感器是否对齐(偏差≤0.5mm)。
错误处理:
液面检测失败:检查导电吸头是否损坏或液体是否导电不足(可添加0.1% Tween 20增强导电性)。
堵针:用0.1mm通针清洁或超声处理(40kHz,5分钟)。
记录维护日志:记录每次校准数据(如重量法测得1000μL实际值为998±2μL)。
6. 安全注意事项
紧急停止:熟悉急停按钮位置(通常位于正面右下角),测试响应时间(≤0.5秒)。
电气安全:使用稳压电源(220V±10%),接地电阻<4Ω。
机械限位:定期检查Z轴限位开关,防止撞针(建议每月用限位卡尺校验)。
7. 数据与合规
审计追踪:启用操作日志功能(如记录用户ID、时间戳、体积参数),符合GLP/GMP要求。
版本控制:备份液体处理程序(如.DAT文件),标注修改日期和操作者。
示例场景:
处理96孔板PCR反应体系时,建议:
使用20μL低吸附吸头
设置5μL预分配体积(避免首滴误差)
分装后孔间吹吸3次(混合体积为体系10%)
通过严格遵循上述规范,可显著降低CV值(如从5%降至2%),并延长设备寿命(平均故障间隔时间MTBF≥5000小时)。
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