TAE與TBE電泳緩沖液:性能差異與應(yīng)用場(chǎng)景解析
在核酸分析實(shí)驗(yàn)中,緩沖液的選擇直接影響電泳分辨率、條帶質(zhì)量及下游操作兼容性。TAE(Tris-乙酸鹽-EDTA)與TBE(Tris-硼酸鹽-EDTA)作為兩種核心緩沖體系,其理化性質(zhì)的差異導(dǎo)致顯著不同的應(yīng)用場(chǎng)景。
一、關(guān)鍵性能對(duì)比
1. 分辨率與片段適用性
緩沖液 | 最佳分離范圍 | 遷移特性 | 局限性 |
TAE | >1 kb DNA | 遷移速率快,條帶銳利 | 小片段(<500 bp)易擴(kuò)散 |
TBE | <1 kb DNA/RNA | 高分辨率,條帶緊密 | >5 kb DNA條帶壓縮模糊 |
2. 緩沖能力與穩(wěn)定性
- TAE:
- 緩沖能力弱(乙酸鹽pKa=4.76)
- 長時(shí)間電泳(>4 h)時(shí)陰極區(qū)酸化(pH↓),導(dǎo)致DNA遷移率下降、條帶扭曲
- TBE:
- 強(qiáng)緩沖體系(硼酸鹽pKa=9.24)
- 耐受高電壓(>10 V/cm)及過夜電泳,pH波動(dòng)<±0.2
二、下游應(yīng)用兼容性
操作類型 | TAE適配性 | TBE適配性 |
膠回收DNA | ? 直接用于酶反應(yīng) | ? 需純化去除硼酸鹽 |
限制性酶切 | ? 無抑制 | ? 硼酸鹽螯合Mg2?抑制酶活 |
連接/PCR | ? 兼容 | ? 需乙醇沉淀預(yù)處理 |
RNA電泳 | ? 乙酸促進(jìn)降解 | ? 首先選擇(穩(wěn)定結(jié)構(gòu)) |
三、特殊場(chǎng)景選型指南
實(shí)驗(yàn)需求 | 推薦緩沖液 | 科學(xué)依據(jù) |
質(zhì)粒超螺旋DNA分析 | TAE | 避免硼酸鹽干擾拓?fù)洚悩?gòu)體遷移 |
PAGE(蛋白質(zhì)/小核酸) | TBE | 高分辨率+抗高壓特性(300-500 V) |
基因組大片段分離(>20 kb) | TAE | 低電導(dǎo)率減少DNA拉伸效應(yīng) |
Northern blot(RNA分析) | TBE | 甲醛變性膠中保持RNA完整性 |
> 注:聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE)需采用TBE(濃度建議:5-10%膠用0.5×TBE,15%膠用1×TBE)
四、操作優(yōu)化建議
- TAE補(bǔ)救策略:
- 每4 h循環(huán)緩沖液或添加陰極區(qū)緩沖池(維持pH>7.5)
- TBE純化方案:
- 膠回收DNA經(jīng)苯酚抽提或硅膠柱純化(ce di去除硼酸鹽)
中科百抗解決方案
為保障實(shí)驗(yàn)可重復(fù)性,中科百抗提供:
- 嚴(yán)格質(zhì)控的TAE/TBE速溶顆粒:
- 內(nèi)控標(biāo)準(zhǔn):電導(dǎo)率波動(dòng)<2%,DNase/RNase-Free認(rèn)證
- 場(chǎng)景化產(chǎn)品線:
產(chǎn)品類型 | 適用場(chǎng)景 |
TAE-HR | 大片段DNA分析(>5 kb) |
TBE-RNase | RNA電泳及Northern blot |
TBE-PAGE | 聚丙烯酰胺凝膠高分率分離 |
> 技術(shù)支撐:批次間一致性驗(yàn)證(HPLC離子色譜法),滿足高通量檢測(cè)需求
總結(jié):TAE與TBE的選擇本質(zhì)是 “分辨率-穩(wěn)定性-下游兼容性”的平衡。明確實(shí)驗(yàn)?zāi)繕?biāo)(片段大小、檢測(cè)精度、后續(xù)操作)可快速鎖定zui you緩沖體系,為分子診斷與基因功能研究奠定技術(shù)基礎(chǔ)。
五、產(chǎn)品推薦
TAE緩沖液速溶顆粒
No.BM28R01
TAE是一種簡便、快速的核酸電泳緩沖液,廣泛應(yīng)用于DNA瓊脂糖凝膠電泳。TAE為白色至類白色速溶顆粒。TAE速溶顆粒是指將日常實(shí)驗(yàn)工作中用到的TAE緩沖液(89 mM Tris,89 mM硼酸,2 mM EDTA)以速溶顆粒的形式呈現(xiàn)。TAE速溶顆粒使用簡單、快速,無需計(jì)算、稱量、調(diào)節(jié)pH等繁瑣的配液過程,即取即用;此外,TAE速溶顆粒的標(biāo)準(zhǔn)化大規(guī)模生產(chǎn)工藝可避免人為配液過程中的誤差,保證緩沖液的批內(nèi)及批間穩(wěn)定性。
規(guī)格: 5*1L/50*1L
價(jià)格: 詢價(jià)
保存溫度:常溫
效期:自生產(chǎn)之日起36個(gè)月
運(yùn)輸條件:常溫
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