小鼠肺炎病毒(pneumonia virus of mice,PVM),屬副粘病毒科,肺炎病毒屬。負性單鏈RNA病毒,多態(tài)病毒粒子在活體肺組織中復(fù)制周期是24~ 30 h,可通過氣溶膠和接觸呼吸道傳播。小鼠是天然的宿主,是PVM國標(biāo)中規(guī)定需要排除的病原。PVM呈嚴(yán)格的嗜肺性,主要經(jīng)呼吸道傳播。
接種小量的病毒后文氣管上皮細胞就會有大量的PVM復(fù)制, 如不及時處理,PVM感染和繼發(fā)炎性應(yīng)答終會導(dǎo)致肺水腫、呼吸衰竭和死亡。PVM感染免疫功能健全大小鼠多無臨床癥狀,但動物免疫功能受損的動物可出現(xiàn)慢性肺炎,動物感染后表現(xiàn)食欲下降、消瘦、呼吸急促等癥狀,嚴(yán)重時導(dǎo)致動物死亡,干擾免疫學(xué)等相關(guān)研究。
目前PVM的檢測方法是多是進行PVM抗體檢測,但是這種方法的窗口期較長,需要一定的時間體內(nèi)產(chǎn)生抗體,好處是可以查看既往感染歷史。目前建立了PCR的檢測方法,PCR的檢測可識別動物早期感染,做到早預(yù)警早處理,可作為血清學(xué)檢測方法有益補充。
翼和生物建立小鼠肺炎病毒RT-PCR檢測方法,SPF.M/R-RV-001和SPF.M/R-RVH-002用于實驗動物及實驗動物相關(guān)樣本的檢測,檢測低至10 copies/μL, 樣本濃度在10^1-10^8范圍內(nèi),濃度梯度和CT值有很好的線性關(guān)系。建立的PVM RT-PCR方法特異、敏感,重復(fù)性、穩(wěn)定性好,能夠用于小鼠、大鼠等實驗動物的監(jiān)測及其相關(guān)樣本的檢測。用的是多重qPCR檢測的方式,用不同的熒光檢測不同的病原體,在翼和的產(chǎn)品中無論是聯(lián)檢和鑒定試劑盒中都是用hex熒光進行檢測,檢測靈敏度高,特異性強,建立的這種簡便、快速RT-PCR檢測方法為實驗動物的質(zhì)量控制提供必要、可靠的檢測技術(shù)手段。
相關(guān)產(chǎn)品
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