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【MDS Express】Cleanert PPT蛋白沉淀板产品使用操作

来源:艾杰尔飞诺美   2025年07月18日 15:04  
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Cleanert PPT (Protein Precipitation Plate) 蛋白沉淀产品采用高纯蛋白沉淀专用筛板,能够有效阻截乙腈等常用蛋白沉淀溶剂,避免发生渗透现象。与传统 PPT 方法相比,不需要额外耗时的样品前处理步骤,可实现生物样品( 血浆、血清等) 的自动化、高通量处理,在完成蛋白沉淀后,施加正压或负压收集流出液,从而实现血浆(或血清、尿液等)样品的高通量蛋白去除。

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产品特点


操作简便快速,孔内沉淀;


无渗漏现象,防止样品过早流出和蛋白沉淀不完-全;


有效去除蛋白干扰,提高分析灵敏度。


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操作步骤


01

准备实验 


将Cleanert PPT 96蛋白沉淀板放置于收集板上。 


注:放置时沉淀板与收集板缺口端对齐于左下端,这样可快速正确调整放置位置。使左边孔位显示为“A-H”,上端显示为“1-12”,便于查找和标识。 


02

加入沉淀试剂


每孔加入不少于3倍样品体积的沉淀试剂,如乙腈或甲醇。 


注: Cleanert PPT 96蛋白沉淀板设计可保证乙腈加入后60 min、甲醇加入后15 min不会穿透,保证充足的操作时间。乙腈作为沉淀剂时,乙腈与样品建议比例3:1以上;甲醇作为沉淀剂时,建议比例4:1以上。为保证获得最佳沉淀效果,建议先加沉淀试剂再加入样品。


03

加入待处理样品


将待处理的血浆、血清等样品分别加入到蛋白沉淀板各孔中。


注:如需分别添加内标物、稀释样品、加快上样速度等操作,可预先将样品分别移取至另一块收集板中,使用多位移液枪进行移取样品操作。当加入待处理样品后,会和沉淀剂迅速作用生成沉淀,后续操作将不会引起沉淀板穿透。 


04

蛋白沉淀


将蛋白沉淀板放置于96位漩涡混合器上,调节转速到600-800转/min,充分混合5 min,然后静置5 min。 


05

过滤 


使用正压仪器将沉淀后澄清溶液全部压入96孔接收板中(压力推荐为0.03-0.04 MPa),盖上硅胶盖板,防止试剂挥发,待用于仪器测试。 


注:可根据样品粘稠度调节压力;当少量孔样品流速较慢时也可适当提高压力。 


实验Q&A


Q

我按照操作步骤进行的实验,但是收集到的滤液是浑浊的,可能是什么原因导致的?

A

如果收集到的溶液出现浑浊的情况,可能是沉淀不充分导致??梢酝ü鹘诔恋硎约良坝昧?、延长沉淀时间、增加涡旋转速等方式改善。 

Q

对于全血基质的细胞裂解方式有建议吗?

A

?建议1:将3份去离子水加入到1份全血样本中,涡旋3-5秒,以3700 rpm的转速离心10分钟并收集上清液。

?建议2:在室温下对全血样本进行超声处理15分钟,然后以3700 rpm的转速离心10分钟,收集上清液

?建议3:将三份0.1M硫酸锌/0.1M乙酸铵溶液加入一份全血样本中。涡旋3-5秒,以3700 rpm的转速离心10分钟,收集上清液。


上清液收集之后,向蛋白沉淀板中加入3倍体积的乙腈,涡旋板两分钟。对板施加真空并收集流出物,氮吹干燥,在流动相中复溶。

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