細胞簡介

平臺編號：Bio-132213

規(guī)格：1×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

細胞信息：WIL2-S

細胞名稱：(WIL2-S細胞)人B淋巴細胞

細胞生長：懸浮生長

細胞形態(tài)：淋巴母細胞樣

細胞數(shù)量：1×106個細胞數(shù)

細胞特性：不分泌免疫球蛋白HAT敏感

細胞純度：94％

細胞活力：90％（ViabilitybyTrypanBlueExclusion）

細胞檢測：細胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌

細胞凍存：液氮凍存（基礎培養(yǎng)基+10%DMSO+20%FBS）

細胞運輸：干冰運輸（1Vial）或活細胞運輸（T-25flasks）

細胞用途：只可用于科研不可用于臨床診斷和治療

注意事項：僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用（產品信息以出庫為準）

(WIL2-S細胞)人B淋巴細胞培養(yǎng)條件：

1、培養(yǎng)基：RPMI-1640培養(yǎng)基（不含Hepes）+ 10%胎牛血清+ 1%雙抗+800ng/ml Taxol

2、溫度：37.0°C

3、氣體:空氣 95%，CO2 5%

(WIL2-S細胞)人B淋巴細胞培養(yǎng)方法：

收到細胞后，在倒置顯微鏡下觀察整個細胞生長情況：

如果細胞未長滿，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內，嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶，留10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。

如果細胞已長滿（達80-90%）。即可進行傳代，具體步驟如下：

a，棄去培養(yǎng)液，用PBS洗1-2次。

b，向瓶內加入1.0-2.0ml胰蛋白酶液，在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓，迅速拿回操作臺，吸取胰蛋白酶，加含有6ml 含10%血清的培養(yǎng)液，輕輕吹打細胞。

c，加入等量的的培養(yǎng)液，輕輕吹打混勻后吸出一半，分到新的培養(yǎng)

d，傳代比例：1:2-1:3

溫馨提示：培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)液是加入*高藥物濃度的，為800ng/ml。我們采取緩慢增加藥物的梯度的方法。具體步驟是，首先加含200ng/mlTaxol藥物的培養(yǎng)液，放入培養(yǎng)箱，這段時間會有小部分細胞懸浮起來，屬于正常情況，通過換液可以去掉，等細胞待長滿就可以消化傳代了，這時可以一直用含藥物培養(yǎng)液來消化培養(yǎng)細胞，一兩代之后就可以將藥物濃度提高到500ng/ml，兩代后可以將藥物濃度提高至*高水平800ng/ml，含藥物培養(yǎng)液用于細胞培養(yǎng)都沒有問題，凍存的時候就不要在凍存液里加藥物了。

(WIL2-S細胞)人B淋巴細胞保存和應用：

客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞，如是新鮮原代細胞，客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內靜置后2-3h，再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞，客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。

(WIL2-S細胞)人B淋巴細胞復蘇的原則：

在實際操作中，凍存細胞要進行復蘇，再培養(yǎng)傳代。復蘇細胞一般采用快速融化法。以保證細胞外結晶快速融化，以避免慢速融化水分滲入細胞內，再次形成胞內結晶損傷細胞。

如何選購上等的(WIL2-S細胞)人B淋巴細胞？

1）該細胞只能用于科研，不得用于臨床應用。

2）收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

3）仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等。

4）用75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落，將細胞置于培養(yǎng)箱內靜置培養(yǎng)過夜，隔天再取出觀察。此時多數(shù)細胞均會貼壁，若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍染色測定細胞活力，如果證實細胞活力正常，請將細胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng)；如果染色結果顯示細胞無活力，請拍下照片及時和我們聯(lián)系，信息確認后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次。

5）請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內多余的培養(yǎng)基可收集備用，細胞傳代時可以一定。

(WIL2-S細胞)人B淋巴細胞售后服務：

1）發(fā)貨時附：細胞實拍圖片兩張、細胞培養(yǎng)說明、細胞操作處理方法、細胞質量問題反饋表等。

2）細胞污染問題，請在收到產品48小時內給我們真實的實驗結果；細胞活性問題，請在收到產品7天內給我們真實的實驗結果，我們調查核實后予免費調換，不收取任何費用。

3）如用戶收到細胞8-15天之內因處理不當造成細胞死亡或污染，我公司將以6.5折優(yōu)惠價重新提供一株原細胞。

4）如用戶在16-30天內因處理不當造成細胞死亡或污染，我公司將以8折優(yōu)惠價重新提供一株原細胞。

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