ATTO 590 NHS Ester 是一種基于羅丹明（Rhodamine）結(jié)構(gòu)的新型熒光標(biāo)記物，具有強(qiáng)吸收、高熒光量子產(chǎn)率、高熱穩(wěn)定性和光化學(xué)穩(wěn)定性。它適用于單分子檢測(cè)和高分辨率顯微鏡技術(shù)，如PALM、dSTORM和STED。    

基礎(chǔ)知識(shí)概述:    

英文名： ATTO 590 Succinimidyl Ester，ATTO 590 NHS ester

分子式：C41H42ClN3O11

分子量：788.24 

規(guī)格標(biāo)準(zhǔn)：1mg、5mg、10mg 

試劑廠家：陜西新研博美生物科技有限公司

相關(guān)應(yīng)用：

ATTO 590 NHS Ester 可用于標(biāo)記蛋白質(zhì)、抗體和胺修飾的寡核苷酸。它還可用于流式細(xì)胞術(shù)（FACS）、熒光原位雜交（FISH）、FRET等生物檢測(cè)。此外，它也可以作為Alexa Fluor 594的替代品。

使用方法：

1.標(biāo)記蛋白質(zhì)：

準(zhǔn)備蛋白質(zhì)溶液：將目標(biāo)蛋白質(zhì)溶解在PBS緩沖液（pH 7.2-7.4）中，確保蛋白質(zhì)濃度在2-10 mg/mL之間。

調(diào)整pH值：如果蛋白質(zhì)溶液的pH值低于8.0，使用1 M碳酸氫鈉溶液或pH 9.0的磷酸鹽緩沖液調(diào)整pH至8.0-9.0。

制備染料溶液：將ATTO 590 NHS Ester溶解在無水DMSO中，制備10 mM的染料溶液。

反應(yīng)：將染料溶液與蛋白質(zhì)溶液按10:1的摩爾比混合，室溫下反應(yīng)30-60分鐘。

純化：使用Sephadex G-25凝膠過濾柱去除未結(jié)合的染料。

2.標(biāo)記寡核苷酸：

ATTO 590 NHS Ester可用于標(biāo)記胺修飾的寡核苷酸，適用于熒光成像和FRET應(yīng)用

注意事項(xiàng)：

溶劑選擇：染料溶液應(yīng)在無水DMSO或乙腈中制備，避免使用含有胺的溶劑。

反應(yīng)條件：反應(yīng)pH值應(yīng)控制在8.0-9.0之間，以確保最佳反應(yīng)效率。

儲(chǔ)存條件：染料溶液應(yīng)避光保存于-20°C，避免反復(fù)凍融。

純化步驟：標(biāo)記后的蛋白質(zhì)或寡核苷酸需要通過凝膠過濾或色譜法去除未結(jié)合的染料。

結(jié)構(gòu)式：

質(zhì)量控制：95%+