DNA定量分光光度計(jì)對濃度的測定判定

來源：上海牧榮生物科技有限公司 2025年06月25日 11:32

DNA定量分光光度計(jì)是一種基于核酸分子在特定波長下對紫外光的吸收特性來測定DNA濃度的儀器，其濃度測定判定主要依據(jù)吸光度值（A）及相關(guān)比值，以下為你詳細(xì)介紹：

濃度測定原理

DNA分子中的堿基具有共軛雙鍵結(jié)構(gòu)，在260nm波長處有最大吸收峰。根據(jù)朗伯-比爾定律，吸光度與溶液中吸光物質(zhì)的濃度成正比，即A=

varepsiloncl（其中A為吸光度，

varepsilon為摩爾吸光系數(shù)，c為溶液濃度，l為光程長度）。通過測量DNA溶液在260nm處的吸光度，再結(jié)合已知的摩爾吸光系數(shù)和光程長度，即可計(jì)算出DNA的濃度。

?比值應(yīng)大于2.0。如果比值低于2.0，可能表示樣品中存在鹽離子、酚、氯仿等雜質(zhì)。

影響測定結(jié)果的因素及注意事項(xiàng)

樣品純度：樣品中的蛋白質(zhì)、RNA、鹽離子、有機(jī)溶劑等雜質(zhì)會(huì)影響吸光度的測量，從而影響濃度測定的準(zhǔn)確性。因此，在測定前應(yīng)盡量提高DNA樣品的純度。

樣品稀釋：如果樣品濃度過高，需要進(jìn)行適當(dāng)?shù)南♂?。稀釋時(shí)應(yīng)使用與測量時(shí)相同的緩沖液，并且要準(zhǔn)確記錄稀釋倍數(shù)。

儀器校準(zhǔn)：定期對分光光度計(jì)進(jìn)行校準(zhǔn)，確保儀器的準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性。校準(zhǔn)包括波長校準(zhǔn)和吸光度校準(zhǔn)等。

測量環(huán)境：測量時(shí)應(yīng)避免強(qiáng)光直射和溫度變化過大，以免影響測量結(jié)果。同時(shí)，要保持比色皿的清潔，避免劃痕和污染。

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