细胞培养添加物是优化细胞生长环境的关键组分，其作用涵盖营养供给、pH 稳定及代谢调控等。以下是主要添加物的分类说明：

一、基础营养添加物

?L-谷氨酰胺?

?作用?：核心能量来源，参与蛋白质合成和核酸代谢36。

?缺陷?：水溶液中自发降解（4℃存放1周降解50%），产生有毒氨类物质36。

?替代方案?：

?GlutaMAX-I?（L-丙氨酰-L-谷氨酰胺）：通过肽酶缓慢释放谷氨酰胺，稳定性高，避免氨毒性。

?D-葡萄糖?

?作用?：主要碳源，支持能量代谢。

?类型差异?：

低糖型（1 g/L）：适合贴壁细胞（如成纤维细胞）。

高糖型（4.5 g/L）：适用于快速增殖细胞（如CHO细胞、杂交瘤细胞）。

?丙酮酸钠?

?作用?：替代碳源，在葡萄糖不足时维持能量供应。

二、缓冲系统与pH稳定剂

?碳酸氢钠?

?作用?：与CO?形成缓冲对，维持pH 7.2–7.4。

?使用条件?：

高浓度（1.5–3.7 g/L）：需5–10% CO?环境。

低浓度（0.35 g/L）：无需CO?培养箱。

?HEPES缓冲剂?

?作用?：非CO?依赖型缓冲剂，防止pH波动（尤其适用于克隆化培养）。

?优势?：无细胞毒性，长期维持pH稳定。

?酚红指示剂?

?作用?：pH可视化指示（红：中性；黄：酸性；紫：碱性）。

?局限性?：

干扰流式细胞检测；

模拟雌激素活性，影响激素敏感细胞（建议无血清培养时去除）。

三、血清及替代成分

?胎牛血清（FBS）?

?作用?：提供生长因子、激素及黏附蛋白，促进细胞增殖。

?添加比例?：常规培养需10%浓度。

?无血清替代添加剂?

?成分?：特定生长因子（如EGF、胰岛素）、载体蛋白（如转铁蛋白）及微量元素。

?优势?：成分明确，减少批次差异，避免病毒污染风险。

四、其他功能添加物

 ?维生素与微量元素?

?B族维生素?：辅酶因子，支持代谢（如B?参与糖代谢脱羧）。

?微量元素?（铁、锌等）：

铁：氧运输与呼吸链关键组分；

锌：调节酶活性及细胞增殖。

?抗生素?

?常用组合?：青霉素-链霉素（双抗），预防细菌污染。

?注意?：长期使用可能掩盖低水平污染，干扰实验结果。

五、应用选择建议

注：实际应用中需根据细胞特性（如代谢需求、激素敏感性）及实验目的（如生产vs.研究）优化添加物组合。