紫外-可見(jiàn)分光光度法是一種強(qiáng)大的分析技術(shù),用于各種科學(xué)領(lǐng)域,用于測(cè)量電磁波譜的紫外 (UV) 和可見(jiàn)光 (Vis) 范圍內(nèi)的光吸收率。通過(guò)測(cè)量通過(guò)樣品溶液的光強(qiáng)度并將其與入射光的強(qiáng)度進(jìn)行比較,紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)提供了有關(guān)材料特性及其與光相互作用的寶貴信息。本篇博客文章將介紹紫外-可見(jiàn)分光光度法的組成部分、工作原理、應(yīng)用和優(yōu)勢(shì)。
紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)的工作原理
當(dāng)入射光照射到物體上時(shí),它可以被吸收、反射或透射。分光光度計(jì)可測(cè)量在 UV 和 Vis 范圍內(nèi)吸收的光的強(qiáng)度。測(cè)量通過(guò)樣品傳輸?shù)墓?,并與入射光源的參考測(cè)量值進(jìn)行比較。通過(guò)應(yīng)用比爾-朗伯定律(該定律指出吸收的光量與樣品濃度和光程長(zhǎng)度成正比),分光光度計(jì)可以確定樣品中特定分析物的濃度。
紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)的基本組件
紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)由幾個(gè)關(guān)鍵組件組成,它們協(xié)同工作以實(shí)現(xiàn)準(zhǔn)確和精密的測(cè)量:
入口狹縫:控制入射光束的寬度和對(duì)齊方式,確保樣品得到一致的照明。
準(zhǔn)直鏡:準(zhǔn)直鏡聚焦光束,使其在進(jìn)入光柵之前平行。
單色器:?jiǎn)紊鞣蛛x不同波長(zhǎng)的光,只允許窄波段通過(guò)樣品。
樣品架:樣品架,通常是微量?jī)x器的比色皿或平行樣品座,將樣品溶液固定到位,使光線能夠均勻地穿過(guò)樣品。
檢測(cè)器:檢測(cè)器測(cè)量光穿過(guò)樣品后到達(dá)它的強(qiáng)度。紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)中常用的檢測(cè)器包括光電倍增管和 CCD 檢測(cè)器。
紫外-可見(jiàn)分光光度法的應(yīng)用
紫外-可見(jiàn)分光光度法在各種科學(xué)學(xué)科中都有廣泛的應(yīng)用。一些值得注意的應(yīng)用包括化學(xué)分析、核酸和蛋白質(zhì)分析等。我們將在下面更詳細(xì)地介紹它們。
化學(xué)分析
紫外-可見(jiàn)分光光度法廣泛用于教學(xué)和工業(yè)材料科學(xué)實(shí)驗(yàn)室,以量化生物分子、有機(jī)化合物和無(wú)機(jī)金屬。由于其易用性和速度,這是一種受歡迎的方法。
微量分析
隨著技術(shù)的進(jìn)步,現(xiàn)代紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)能夠分析小至 0.5 μL 的微量樣品,使其適用于有限的樣品量。
核酸和蛋白質(zhì)分析
使用紫外-可見(jiàn)分光光度法可以準(zhǔn)確測(cè)定核酸和蛋白質(zhì)的濃度,從而在遺傳學(xué)、分子生物學(xué)和生物化學(xué)中實(shí)現(xiàn)重要應(yīng)用。許多儀器都帶有預(yù)配置或成分明確的染料和蛋白質(zhì)類型,易于使用。
藥物研究
在制藥行業(yè),紫外-可見(jiàn)分光光度法在識(shí)別和定量藥品中的化合物、確保其質(zhì)量和功效方面發(fā)揮著至關(guān)重要的作用。
純度測(cè)試
紫外-可見(jiàn)分光光度法用于評(píng)估 DNA 樣品的純度,確保其適用于各種下游應(yīng)用,如 PCR 和 DNA 測(cè)序。
質(zhì)量控制和分析
該技術(shù)廣泛用于制藥、食品和化妝品等行業(yè),以確保材料和產(chǎn)品的質(zhì)量和一致性。
紫外-可見(jiàn)分光光度法的優(yōu)缺點(diǎn)
紫外-可見(jiàn)分光光度法具有多種優(yōu)勢(shì),使其成為各種科學(xué)領(lǐng)域的多功能且有價(jià)值的分析工具。
易于使用的自然
該技術(shù)相對(duì)簡(jiǎn)單,現(xiàn)代分光光度計(jì)通常帶有用戶友好的軟件界面,即使是非專家也可以使用。
非破壞性
紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)可實(shí)現(xiàn)無(wú)損分析,可應(yīng)用于多種化學(xué)物質(zhì)。這允許重復(fù)研究樣品,因?yàn)樗鼈儾粫?huì)損壞,這對(duì)于質(zhì)量保證和質(zhì)量控制目的非常重要。
快速分析
紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)提供快速高效的分析,使研究人員能夠在幾秒鐘內(nèi)獲得結(jié)果。它用于定量生物樣品中的核酸和蛋白質(zhì)含量,以及用于藥品和食品工業(yè)的質(zhì)量控制。
然而,與熒光定量等方法相比,紫外-可見(jiàn)分光光度法有一些缺點(diǎn)。它表現(xiàn)出較低的靈敏度和選擇性,限制了它在某些應(yīng)用中的有效性。吸收測(cè)量的精度會(huì)受到雜散光的影響,可能會(huì)影響光譜測(cè)量精度1,2,這是分光光度計(jì)設(shè)計(jì)中的一個(gè)關(guān)鍵考慮因素。
紫外-可見(jiàn)分光光度法是各種科學(xué)領(lǐng)域中用于測(cè)量紫外和可見(jiàn)光范圍內(nèi)的光吸光度的重要分析技術(shù)。其非侵入性、快速分析能力和廣泛的應(yīng)用范圍使其成為化學(xué)、生物學(xué)、制藥、食品和飲料以及材料科學(xué)領(lǐng)域的寶貴工具。
使用 DeNovix 進(jìn)行紫外-可見(jiàn)分光光度法
紫外-可見(jiàn)分光光度法的持續(xù)進(jìn)步將進(jìn)一步增強(qiáng)其功能,使科學(xué)家能夠更深入地了解材料的特性及其與光的相互作用。您有興趣了解更多信息嗎?DeNovix 可以幫助解決這個(gè)問(wèn)題。
DeNovix 的 DS-11 系列改變了分光光度法,提供好的性能和多功能性。這款緊湊型儀器將全光譜紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)與熒光功能相結(jié)合,是快速核酸和蛋白質(zhì)定量的解決方案。
DS-11 系列性能和可用性也非常出色。該儀器配備 EasyApps™,這是一款功能強(qiáng)大且直觀的軟件。該軟件與用戶友好的觸摸屏界面相結(jié)合,可確保無(wú)差錯(cuò)作,并在 3 秒內(nèi)提供從樣品到數(shù)據(jù)的結(jié)果。儀器的設(shè)置非常簡(jiǎn)單,開(kāi)箱即用,無(wú)需 PC 設(shè)置或軟件安裝。
無(wú)論是定量核酸或蛋白質(zhì)、進(jìn)行紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)或定制測(cè)量、進(jìn)行熒光測(cè)定還是動(dòng)力學(xué)分析,DS-11 系列都提供了預(yù)配置的應(yīng)用程序和功能,可優(yōu)化工作流程并提供準(zhǔn)確的結(jié)果。
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