揭示lncRNA Gm28309在RAW264.7和THP-1巨噬細(xì)胞中調(diào)控布魯氏菌炎癥反應(yīng)的ceRNA機(jī)制

1. 文章主要研究方向

標(biāo)題：《Brucella-Induced Downregulation of lncRNA Gm28309 Triggers Macrophages Inflammatory Response Through the miR-3068-5p/NF-κB Pathway》

方向：研究布魯氏菌（Brucella）感染如何通過下調(diào)長(zhǎng)鏈非編碼RNA（lncRNA Gm28309）激活miR-3068-5p/NF-κB信號(hào)通路，從而觸發(fā)巨噬細(xì)胞的炎癥反應(yīng)及其分子機(jī)制。

2. 2024年影響因子

期刊：Frontiers in Immunology

影響因子：約8.8。

3. ZETA life轉(zhuǎn)染試劑（AD600150）的應(yīng)用

轉(zhuǎn)染細(xì)胞及基因：

• RAW264.7細(xì)胞（小鼠巨噬細(xì)胞系）：

  ? 轉(zhuǎn)染基因：lncRNA Gm28309過表達(dá)質(zhì)粒（Gm28309-pcDNA3.1）、miR-3068-5p mimic/inhibitor、siRNA靶向p65（NF-κB抑制劑）。

• THP-1細(xì)胞（人單核細(xì)胞系，經(jīng)PMA誘導(dǎo)為巨噬細(xì)胞）：

  ? 轉(zhuǎn)染基因：siRNA靶向候選lncRNAs（如P33714、P3852等）。

4. 轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)及解讀

具體實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)：

1. RAW264.7細(xì)胞轉(zhuǎn)染Gm28309（圖4A, 4D）：

  ? 結(jié)果：過表達(dá)Gm28309顯著降低NLRP3炎癥小體蛋白（NLRP3、Pro-caspase-1）和炎性因子（IL-1β、IL-18）的表達(dá)（p<0.05）。

  ? 解讀：ZETA life試劑高效遞送Gm28309質(zhì)粒，驗(yàn)證了其對(duì)炎癥的負(fù)調(diào)控作用。

2. THP-1細(xì)胞轉(zhuǎn)染siRNA靶向lncRNAs（圖3A, 3B）：

  ? 結(jié)果：敲低P33714（Gm28309人源同源物）增加IL-1β/IL-18分泌，促進(jìn)布魯氏菌清除（p<0.01）。

  ? 解讀：試劑成功遞送siRNA，證明lncRNA在炎癥中的關(guān)鍵角色。

3. RAW264.7轉(zhuǎn)染miR-3068-5p mimic（圖5C, 5D）：

  ? 結(jié)果：miR-3068-5p過表達(dá)降低kB-Ras2（NF-κB抑制因子）的熒光素酶活性，激活炎癥通路。

  ? 解讀：試劑高效轉(zhuǎn)染miRNA，揭示ceRNA調(diào)控機(jī)制。

ZETA life試劑的貢獻(xiàn)：

• 高轉(zhuǎn)染效率確?；虿僮鳎ㄟ^表達(dá)/敲低）的可靠性，支撐了全文分子機(jī)制驗(yàn)證。

• 低細(xì)胞毒性保障了炎癥相關(guān)基因表達(dá)的精準(zhǔn)檢測(cè)。