傳統(tǒng)的細(xì)胞系開發(fā)需要好幾個(gè)月的時(shí)間，周期長(zhǎng)，主要受限于單細(xì)胞的分選效率低、成像設(shè)備有邊緣效應(yīng)、成像結(jié)果容易受到雜質(zhì)干擾、ghost cell等問題。

Cytena公司推出的UP.SIGHT單克隆篩選系統(tǒng)是分選和成像一體機(jī)，2min即可分選一塊96孔板，在分選的同時(shí)能進(jìn)行3D全孔細(xì)胞成像，孔底成像功能監(jiān)控細(xì)胞生長(zhǎng)過程，解決上述問題，助力細(xì)胞系開發(fā)駛?cè)搿翱燔嚨馈?/p>

自今年1月份發(fā)布，新老客戶爭(zhēng)相預(yù)約UP.SIGHT Demo實(shí)驗(yàn)，獲得非常好的使用體驗(yàn)。現(xiàn)在和大家分享一波應(yīng)用案例：

●孔板類型：384孔板，96孔板

●細(xì)胞：CHO-K1

1. 分選速度快速

一塊96孔板只需2min！

2.單克隆細(xì)胞來(lái)源保證圖片

1) 噴嘴成像

提供多張噴嘴圖像，從源頭上證實(shí)單細(xì)胞進(jìn)入孔板

2) 3D全孔成像

UP.SIGHT在孔板托盤下方具有高清的相機(jī)，含有單細(xì)胞的液滴一滴進(jìn)孔板的瞬間，底部的相機(jī)能自動(dòng)聚焦，自下而上的層層掃描，覆蓋整孔的體積，直到掃描界面與單細(xì)胞進(jìn)行“相遇”，記錄單細(xì)胞進(jìn)孔的證據(jù)。

3D全孔成像的優(yōu)勢(shì)：

●消除傳統(tǒng)的細(xì)胞分選需要借助離心的方式加速細(xì)胞沉降，避免細(xì)胞被甩到孔的邊緣，出現(xiàn)邊緣效應(yīng)，或者“ghost cell”等問題

● 消除細(xì)胞沉降到底部拍照時(shí)，來(lái)自于孔板本底不干凈/雜質(zhì)的干擾

3. 細(xì)胞生長(zhǎng)監(jiān)測(cè)

從Day0天起監(jiān)測(cè)單細(xì)胞生長(zhǎng)分裂，到第7天可看到明顯的單細(xì)胞克隆團(tuán)。

4.結(jié)論

根據(jù)統(tǒng)計(jì)，一塊384孔板除去陽(yáng)性對(duì)照孔，一共對(duì)378個(gè)孔進(jìn)行了單細(xì)胞分選，對(duì)分選過程中的噴嘴成像、3D全孔成像以及后續(xù)的底板成像進(jìn)行評(píng)估，噴嘴成像顯示得到單細(xì)胞孔378個(gè)，即單細(xì)胞率100%；3D全孔成像顯示得到的單細(xì)胞孔374個(gè)，即單細(xì)胞率98.9%;這也充分表明噴嘴成像和3D全孔成像可以相互佐證，使我們的單細(xì)胞率的正確率無(wú)限接近100%；生長(zhǎng)7天后，330個(gè)孔成功生長(zhǎng)成單細(xì)胞克隆團(tuán)，單克隆率為88.2%。

今年二季度，Cytena將老機(jī)型c/f.sight分別升級(jí)到C.SIGHT 2.0 和F.SIGHT 2.0，并納入U(xiǎn)P.SIGHT家族，升級(jí)后的C.SIGHT 2.0 和F.SIGHT 2.0優(yōu)勢(shì)顯著。