污染是很多生物实验室中细胞培养、细菌培养的噩梦,本人从事培养多年,有些体会,跟大家分享。其实在接种过程中很多规则都是常识,例如紫外杀菌、接种前洗手等等,不再这里重复。但是有一些小细节,却可能是大家忽略的,但是往往恰恰是污染的原因:
1、首先,zui重要的接种室灭菌一定不要省。再的超净台也未必保证*超净。而且当我们操作的时候,手要伸进超净台,可能把菌就带进去啦。如果接种室消毒了,就大大减少了这种机会。其实做法很简单,就是用灭菌水(没有灭菌水用70%酒精)喷到空气中,密集的细小液珠粘着菌落到地上,空气就干净了。zui的例子是我们实验室曾经超净台坏了,空气灭菌后在空气里直接接种昆虫细胞(没有任何抗生素),都没污染。
2、操作一定要快。可能整个超净台中就那么两三个菌,随着空气蜗旋,落在瓶子里,就倒霉了,速度快就大大减少污染概率。
3、特别注意瓶口灭菌。我们常见的做法是对瓶子放进超净台前用酒精喷一下,但是瓶口位置要特别多喷一些,因为接种塞子一拔一塞,zui容易把菌带进瓶子里。
4、超净台一定要空,因为紫外只能表面杀毒,装太多东西就容易污染。
5、枪头要用酒精喷一下,因为常常会把枪头伸进瓶内接种,就算不接触瓶壁,也难免表面上粘得菌落到瓶里。
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