S100-β蛋白ELISA试剂盒技术详解：原理、操作与应用

摘要

S100-β蛋白作为神经系统损伤和胶质细胞活化的特异性标志物，在临床诊断和科研中具有重要价值。本文详细介绍了S100-β蛋白ELISA试剂盒的技术原理、操作流程、注意事项及临床应用，为研究人员提供全面的技术参考。

关键词：S100-β蛋白、ELISA试剂盒、神经系统标志物、实验操作、临床应用

1. S100-β蛋白概述

S100-β蛋白是一种分子量约为10.5kDa的钙结合蛋白，主要由中枢神经系统的星形胶质细胞和施万细胞分泌。作为神经系统特异性蛋白，S100-β在细胞周期调控、能量代谢和细胞内钙稳态维持中发挥重要作用。

1.1 生物学功能

• 参与细胞增殖与分化调控

• 维持细胞内钙离子平衡

• 影响细胞骨架动力学

• 调节酶活性

1.2 临床意义

• 创伤性脑损伤的早期诊断标志物

• 阿尔茨海默病等神经退行性疾病的监测指标

• 脑卒中预后评估

• 胶质瘤等神经系统肿瘤的辅助诊断

2. S100-β蛋白ELISA试剂盒技术原理

酶联免疫吸附试验(ELISA)是目前检测S100-β蛋白常用的方法，具有灵敏度高、特异性强、操作简便等优势。

2.1 双抗体夹心法原理

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA技术：

1. 包被：抗人S100-β单克隆抗体预包被于微孔板

2. 结合：样本中的S100-β蛋白与包被抗体结合

3. 标记：加入生物素标记的抗人S100-β二抗

4. 显色：加入HRP标记的链霉亲和素，TMB底物显色

5. 终止：硫酸终止反应，450nm测定OD值

S100-β蛋白ELISA试剂盒技术详解：原理、操作与应用

试剂盒性能

1.  检测范围：0.25 ng/mL – 8 ng/mL。

2.  灵敏度：检测浓度小于0.1 ng/mL。

3.  特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

 重复性：板内变异系数小于10% ，板间变异系数小于15% 。