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人生长分化因子15(GDF15)ELISA试剂盒技术解析与应用指南

来源:上海仁捷生物科技有限公司   2025年04月02日 15:31  

人生长分化因子15(GDF15)ELISA试剂盒技术解析与应用指南

上海仁捷生物科技有限公司

摘要

人生长分化因子15(Growth Differentiation Factor 15,GDF15)是一种重要的细胞应激反应蛋白,在多种病理生理过程中发挥关键作用。本文详细介绍了上海仁捷生物科技有限公司自主研发的GDF15 ELISA试剂盒的技术原理、性能参数、操作流程及典型应用案例,为研究人员提供全面的技术参考。

1. 产品概述

1.1 GDF15生物学意义

GDF15属于TGF-β超家族成员,又称MIC-1(macrophage inhibitory cytokine-1),具有以下重要功能:

  • 调控能量代谢平衡

  • 参与炎症反应

  • 影响肿瘤发生发展

  • 与心血管疾病密切相关

1.2 上海仁捷GDF15 ELISA试剂盒特点

  • 高灵敏度:检测下限达10 pg/mL

  • 宽检测范围:50-1600 pg/mL

  • 优异特异性:不与TGF-β家族其他成员交叉反应

  • 稳定可靠:批内变异系数<8%,批间变异系数<10%

  • 多种样本适用:血清、血浆、细胞培养上清等

2. 技术原理

2.1 双抗体夹心ELISA原理

本试剂盒采用经典双抗体夹心法:

  1. 包被:高亲和力抗GDF15单抗预包被于微孔板

  2. 结合:样本中GDF15与包被抗体特异性结合

  3. 检测:加入生物素标记的二抗

  4. 信号放大:链霉亲和素-HRP复合物结合

  5. 显色:TMB底物显色反应

2.2 检测系统优化

  • 抗体配对:经过严格筛选的高效抗体对

  • 信号放大:生物素-亲和素放大系统

  • 干扰控制:特殊缓冲体系降低基质效应

3. 实验操作指南

3.1 样本处理建议

样本类型处理方法注意事项
血清室温凝固30min后,2000×g离心15min避免溶血
血浆EDTA抗凝,离心去除血小板及时分离
细胞上清0.22μm滤膜过滤避免反复冻融

3.2 标准操作流程

  1. 试剂准备(室温平衡30min)

  2. 加样(标准品/样本各100μL)

  3. 37℃孵育90min

  4. 洗板(自动洗板机推荐)

  5. 加检测抗体(100μL/孔)

  6. 37℃孵育60min

  7. 洗板

  8. 加酶结合物(100μL/孔)

  9. 37℃孵育30min

  10. 洗板

  11. 显色(TMB,15min)

  12. 终止反应

  13. 450nm读数

3.3 数据分析

  • 四参数拟合标准曲线

  • 质控要求:R2≥0.99

  • 推荐使用专业ELISA分析软件

4. 典型应用案例

4.1 心血管疾病研究

案例:急性心肌梗死患者血清GDF15动态监测
方法:收集50例AMI患者发病后0、6、12、24、48h血清样本
结果:GDF15水平在发病6h显著升高,与心肌损伤程度正相关(r=0.72)

4.2 肿瘤研究

案例:结直肠癌患者预后评估
方法:检测120例患者术前血清GDF15水平
结果:高GDF15组(>200pg/mL)5年生存率显著低于低水平组(38% vs 72%)

4.3 代谢性疾病研究

案例:2型糖尿病肥胖患者干预研究
方法:检测生活方式干预前后GDF15变化
结果:有效减重组GDF15下降幅度显著(P<0.01)

5. 常见问题解决方案

5.1 技术问题排查

问题现象可能原因解决方案
标准曲线不佳标准品溶解不充分充分震荡混匀
背景值高洗板不充分增加洗涤次数
重复性差操作不一致统一操作手法

5.2 结果解读要点

  • 注意样本采集时间(昼夜节律影响)

  • 考虑药物干扰(如二甲双胍可升高GDF15)

  • 结合临床其他指标综合分析

6. 产品服务支持

6.1 上海仁捷特色服务

  • 免费技术咨询:专业团队提供实验设计指导

  • 方法学验证服务:协助完成方法学比对

  • 定制化服务:可根据需求调整检测范围

关键词:GDF15、ELISA试剂盒、上海仁捷生物、心血管标志物、肿瘤标志物、代谢调控


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