使用丁基疏水色譜柱有哪些注意事項？

來源：東曹（上海）生物科技有限公司 2023年11月13日 13:44

丁基疏水柱是一種常用的反相柱之一。它采用具有丁烷基疏水性質(zhì)的有機硅做為填料材料，這種材料既有良好的化學(xué)穩(wěn)定性，同時又能有效地保持化合物分子的親疏水平衡，因而成為很多化學(xué)分離和分析的理想選擇。

丁基疏水柱可以用于分離多種化合物，如有機酸、有機堿、多肽、多糖等，尤其對脂肪酸、磷指等親質(zhì)姓化食物的分離效果非常好。常用于高效液相色譜(HPLC)分離脂溶性化倉物。在蛋白質(zhì)分離方面，丁基疏水柱常用于在酸性條件下分離親水性的多肽，同時也可以分離大大小小的多糖。

使用丁基疏水色譜柱有哪些注意事項？

1、當使用2.1mm內(nèi)徑色譜柱時，建議優(yōu)化系統(tǒng)以減少譜帶展寬。

2、在0.1mL/min流速條件下用純乙腈潤洗色譜柱，然后在2分鐘內(nèi)將流速升至0.5mL/min。

3、使用新鮮潔凈的水與乙腈，沖洗系統(tǒng)，確保系統(tǒng)干凈，不含任何緩沖鹽和污染物。

4、將入口端連接到系統(tǒng)上，柱出口端先不要連接，色譜柱身上有箭頭標明正確流向。

5、重啟流速，按照步驟4的方法逐漸提高流速，至常規(guī)分析時所使用的流速。

6、參考柱效測試報告中的方法，使用該流動相條件平衡色譜柱，通常需要使用5-10倍柱體積的流動相，直至壓力與基線穩(wěn)定。

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